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黄芪（Astragalus membranaceus）是一种广泛栽培的多年生草本植物,其根系具有重要的临床应用价值。干旱胁迫直接影响人工栽培黄芪的产量和品质,严重限制其生长、药效质量及产业发展。深色有隔内生真菌（Dark septate endophyte,DSE）是定殖于根部且不引起植物病害表现的一类小型真菌,具有深棕色或浅色有隔菌丝及微菌核特征性结构;木霉菌（Trichoderma spp.）属于丛梗孢科,是自然界广泛分布的生防菌剂和新型促生剂;它们均具有促进植物生长、改良土壤状况、激活植物抗性等多种生态功能。本研究以黄芪为研究对象,选取自栽培黄芪根系分离的3株优势DSE菌株（Acrocalymma aquatica、Macrophomina pseudophaseolina、Paraphoma radicina）,通过添加PEG-6000设置干旱胁迫梯度,研究了DSE真菌对体外干旱胁迫的适应性及耐受性;联合药用植物根区木霉菌株（Trichoderma afroharzianum和Trichoderma longibrachiatum）进行平板共培养试验,探究DSE真菌与木霉菌共培养特性,筛选优良双回接组合;最终通过外源添加方式开展黄芪盆栽控水试验,综合考察双接种对黄芪幼苗生长、抗旱和药材品质的影响。通过测定黄芪生长、抗旱、营养元素指标、根系药效成分积累量和土壤理化性质,旨在揭示内生真菌双接种对黄芪的促生效应及抗旱机制,为研发高效混合菌剂提供依据。主要试验结果如下:1.DSE真菌体外耐旱试验发现,M.pseudophaseolina和P.radicina耐旱性较高,与菌株在胁迫处理下生长速率、生物量、黑色素、可溶性蛋白含量和超氧化物歧化酶活性增加显著相关。主成分分析表明,可溶性蛋白和生物量是反映DSE真菌响应干旱胁迫的主要指标。DSE菌株可通过调节自身生长、黑色素积累、渗透调节物质和抗氧化防御系统来缓解干旱胁迫的损害。2.平板试验表明,共培养对DSE真菌和木霉菌生长代谢有显著影响;与单培养DSE菌株相比,木霉菌共培养使DSE菌株生物量显著减少,菌丝直径显著增加,隔间距和黑色素含量变化因DSE菌株而异;不同DSE菌株对木霉菌产孢量的影响存在显著差异,P.radicina使T.afroharzianum产孢量较单一培养显著提高了37.92%。主成分分析表明,菌丝直径、菌落半径、生物量和抑制率是反映共培养特征的主要指标。3.DSE菌株可与黄芪形成稳定共生关系,M.pseudophaseolina和T.longibrachiatum双接种黄芪DSE菌丝、微菌核和总定殖率分别较单接种M.pseudophaseolina显著增加了23.33%、6.67%和13.34%。4.灭菌基质盆栽试验中,土壤水分亏缺可显著促进黄芪幼苗生长,不同单接菌处理间生长效应差异显著。单接种M.pseudophaseolina使黄芪根生物量、总根长、根表面积、根直径和根体积显著提高,分别高于未接菌155.56%、55.54%、82.62%、16.67%和115.56%;单接种T.afroharzianum使叶片数和地上生物量显著提高,分别高于未接菌28.68%和31.88%。5.土壤水分亏缺时,DSE真菌与木霉菌双接种可发挥菌株生态功能互补性,显著提高黄芪生长和抗旱性。P.radicina和T.longibrachiatum双接种使黄芪株高、可溶性蛋白、谷胱甘肽和土壤速效磷含量显著增加,而根系MDA、土壤有机碳、铵态氮积累显著降低。M.pseudophaseolina和T.longibrachiatum双接种使黄芪脯氨酸、根系谷胱甘肽和硝酸还原酶显著增加。方差分解分析表明,木霉菌对抗旱指标的影响与DSE种类存在较大的依赖性。综合生长与抗逆指标后,发现P.radicina和T.longibrachiatum双接种具有最优的促生抗旱性能。6.常规培养盆栽试验表明,单接种能够显著促进黄芪根系生长。M.pseudophaseolina显著增加根直径;T.afroharzianum使黄芪根系生物量、根表面积、根总体积、土壤有效磷和脲酶显著提高,分别较未接菌增加了46.84%、102.33%、94.44%、34.48%和24.63%;方差分解表明,土壤养分和木霉菌种类对黄芪生长的影响较大。木霉菌作为根际有益微生物类群的典型代表,可刺激根部细胞分裂和分化,改善土壤生产力,从而调节植物根系发育。7.DSE真菌与木霉菌双接种对黄芪药效成分积累及抗旱性表现出中性或积极效应,并与土壤养分和木霉种类密切相关。P.radicina和T.longibrachiatum双接种使黄芪根系抗坏血酸和谷胱甘肽显著提高,分别较单接种木霉菌增加了54.32%和405.67%;M.pseudophaseolina和T.afroharzianum双接种显著增加了根长、芒柄花黄素和土壤硝态氮;P.radicina和T.afroharzianum双接种显著提高黄芪地上生物量和毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量,而显著降低土壤碱性磷酸酶活性;冗余分析表明铵态氮、硝态氮、有效磷和脲酶是影响黄芪根系生理指标的主要土壤因子。8.DSE真菌与木霉菌能够在改善植物生长、促进养分吸收、增加药效成分积累和提高根系抗逆能力方面发挥协同增效作用。结合其以根入药和节水农业的现实需求,筛选出3组接种效应较好的菌株组合,为研发混合菌剂、提高药用植物栽培能力及生物活性物质积累提供理论依据。