多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶2(pp-GalNAc-T2,E.C.2.4.1.4)的基因克隆、表达及组织表达谱研究

来源 :苏州大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:NobelHsu
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的 多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶是合成O-糖链的起始酶,而目前的研究认为,O-糖基化与分子及细胞识别、肿瘤的发生发展和转移以及胚胎发育等功能密切相关。鉴于国内对O-糖基化功能的研究尚在起步阶段,本文旨在获得稳定表达的pp-GalNAc-T2基因克隆以供进一步研究,并在mRNA水平观察pp-GalNAc-T2在不同人体组织中的分布,为以后的研究提供思路,方法采用Gateway克隆技术,以人脑cDNA库为模板克隆出pp-GalNAc-T2的可溶性部分;采用RT-PCR测定六种不同人体组织中pp-GalNAc-T2的表达,结果 1、利用人工合成的一对引物,以Marathon-ReadyTM人脑cDNA库为模板,成功地扩增到1条pp-GalNAc-T2 cDNA片段,经pDONRTM201克隆载体克隆扩增后抽提质粒并转入原核表达质粒pFASTBAC中,两个重组质粒均经线性化长度鉴定,或加以克隆PCR及测序鉴定后转染DH5α工程菌,SDS-PAGE电泳鉴定表达产物的分子量与文献报道基本相符。2、六种不同人体组织中,以胃肠道组织中pp-GalNAc-T2 mRNA表达水平较高,脑和心肌中等,而肾脏和肝表达较低。结论本研究成功地获得pp-GalNAc-T2的原核重组克隆和表达质粒,为进一步研究打下基础;pp-GalNAc-T2在不同组织中表达的高低有较大差异,提示了它与组织功能的相关性,值得进一步研究。
其他文献
学位
抗体是免疫细胞化学技术的首要试剂,制备具有高特异性和敏感性的高效价抗体在细胞生物学研究方面具有重要意义。目前国内外市场各种特异性抗体日益增多,许多实验室都直接应用市
初三年级是整个初中阶段的重要一年,也是关键的一年,为使学生在英语这门学科上取得更大的进步,在中考中取得优异的成绩,我在教学中尝试了一些教学方法,现作如下总结。1.采用
射频识别(Radio Frequency Identification,RFID)技术,是一种非接触式自动识别技术,它利用电磁波空间耦合实现对静止、移动的待识别物体的自动识别。同其他的一些识别技术相比,射
该文首先对N.viridula的生物学研究背景进行了较为全面的总结,内容包括:四种色斑型形态描述、世界范围和中国范围的分布记录、此物种的起源、生活史概况、行为学研究、经济意
随着现代通信技术的飞速发展,预测复杂环境下的电波传播特性已经成为一个越来越重要的研究课题。其中电波预测模型是非常重要的部分,经过前人的研究和发展,已经提出了不少有
紫杉醇是从红豆杉植物中提取的一种新型抗癌药物。紫杉醇在植物组织中的含量很低,而且植物组织或其细胞培养物的粗提样品中含有较多的杂质不宜分离。高效液相色谱(HPLC)逐渐显示
目的:该研究初步创建了低密度基因芯片,并对人不同肿瘤细胞中的N-乙酰氨基半乳糖转移酶基因家族进行表达谱分析.方法:主要为PCR,TOPO-TA克隆和分子杂交技术.结果:成功地建立
摘要: 在英语教学中,如何提高英语弱科生的成绩让每一个英语教师都感到困惑,作者认为首先应充分了解每位英语弱科生,把握他们的情感特征,从而培养融洽、和谐的师生关系,并引导他们养成良好的课堂、作业习惯;同时教师要选择合适有效的教法,开展丰富多彩的活动,激发他们的兴趣,让英语弱科生学有所得,学有所获,有成就感。  关键词: 英语教学 弱科生 英语成绩 指导策略  笔者从事高中英语教学多
脂蛋白脂肪酶是脂蛋白分解代谢的关键酶,其主要功能是水解CM和VLDL这些脂蛋白中的甘油三酯核心.酶活性的缺陷会造成以血浆甘油三酯升高为主要特征的高脂蛋白血症.多数脂蛋白