论文部分内容阅读
胰腺癌是消化道常见肿瘤之一。近年来,其发病率有增加的趋势。由于早期不易发现,绝大部分胰腺癌患者就诊时已属晚期,失去了手术切除的机会,5年生存率不足5%。因此,积极研究胰腺癌发生发展的分子机制,寻找更好的诊断方法具有重要意义。目前研究表明,胰腺癌在发生发展过程中,存在多种癌基因和抑癌基因的突变。TGF-β超家族是一类具有抑癌和促癌双重活性的细胞因子,TGF-β1是该家族的第一位成员。在正常胰腺细胞,TGF-β1作为肿瘤抑制因子通过其信号系统使细胞停止在G1期,进而抑制细胞增殖。其表达或激活方面的缺陷及TGF-β受体或受体后水平缺陷都可导致生长抑制作用消失而促使细胞恶性增殖。同时肿瘤细胞分泌的TGF-β1通过抑制局部免疫功能,促进肿瘤的生长。Smad4是转导TGF-β信号的重要胞浆内信号级联分子,并负责将信号转导至胞核,发挥转录因子的功能。p27kip1是细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂(CDKI)的一个成员受TGF-β诱导可以使细胞阻滞于G1期。其表达下降与肿瘤的发生、侵袭密切相关。本课题应用免疫组化技术(SABC法)检测TGF-B1、Smad4和p27kip1这三种蛋白在胰腺癌,急慢性胰腺炎及正常胰腺组织中的表达情况,以探讨胰腺癌可能的发病机制及临床意义。材料与方法:1.标本收集自郑州大学第一、二附属医院病理科、新乡市中心医院及郑州市铁路中心医院1994—2002年间的胰腺组织存档蜡块。临床资料齐全。共有原发性胰腺癌42例,急慢性胰腺炎13例,手术切缘经病理确诊的正常胰腺组织郑州大学2004届研究生毕业论文TGP一日1,Smad4和p27kipl在胰腺痛的表达及其意义12例。4um厚连续切片4一5张,分别作H一E和免疫组化染色。2.用免疫组织化学SABC试剂盒检测TGF一pl、枷ad4和p27kiPI蛋白在胰腺癌、急慢性胰腺炎及正常胰腺组织中的表达情况。3.统计工具应用SPSS10.0统计分析软件。统计方法采用xZ检验或精确概率法,取a=0.05为显著性检验水准对资料进行分析。结果:1.TGF一pl蛋白的阳性表达主要定位于细胞质,呈黄色或棕黄色颗粒,弥漫性分布。42例胰腺癌中29例呈阳性表达,其阳性率为69.05%;显著高于12例正常胰腺组织(16.67%)(P<0 .05);而13例急慢性胰腺炎组织表达率为46.15%,与癌组织比较差异无显著性(P>0 .05)。TGF一pl与胰腺癌临床分期及淋巴结转移情况显著相关(P<0 .05),而与病理分级无关(P>.05)。2.Smad4蛋白阳性信号定位于胞质胞核的棕黄色颗粒,局灶性或弥漫性表达。42例胰腺癌中22例表达Smad4蛋白,阳性率为52.38%;13例急慢性胰腺炎及12例正常胰腺组织阳性率分别为84.62%(11/13)和91 .67%(1 1/12),与胰腺癌相比较,均具有显著性差异(P<0 .05)。Smad4表达与胰腺癌病理分级、临床分期和淋巴结转移等无关(P>0 .05)。3.P27kiPI蛋白主要位于细胞核内,呈棕黄色颗粒,胞浆也可呈均匀黄染。胰腺癌组织、急慢性胰腺炎组织和正常胰腺组织中p27kipl蛋白阳性表达率分别是45.24%(19/42)、92.31%(12/一3)和50%(6/12)。胰腺癌中p27kipl阳性表达显著低于急慢性胰腺炎(P<0 .05)。14例高分化胰腺癌有10例p27kiPI蛋白阳性表达,阳性表达率为71.43%,显著高于中低分化的32.14%(9/28)(P<O.05);无淋巴结转移组和临床I、n期组阳性表达率为72.22%(13/l8),其表达率显著高于有淋巴结转移组和临床m、W期组(P(0 .05)。4.TGF一pl与Smad4蛋白在胰腺癌中的表达显著相关(P(0.05),而与p27kipl蛋白表达之间则无密切相关性;42例胰腺癌中,Smad4与p27kiPI共阳性者8例,共阴性者9例;Smad4阳性而p27kipl阴性者14例;Smad4阴性而p27kipl郑州大学2004届研究生毕业论文TGF一pl,smad4和p27kipl在胰腺癌中的表达及其意义阳性表达者n例,经统计分析,两者间无密切相关性(P>0 .05)。结论:1 .TGF一pl在胰腺癌中高表达,可能在促进肿瘤局部浸润转移中发挥重要作用。检测其蛋白水平可能具有辅助诊断和判断预后的意义。2.胰腺癌中Smad4表达降低,检测Slnad4蛋白可作为胰腺癌的辅助诊断,对临床鉴别胰腺癌与胰腺炎可能具有一定的实用价值。3.p27kipl蛋白表达下降与胰腺癌组织分化程度、临床分期及淋巴结转移相关,可作为胰腺癌恶性程度的指标。4.胰腺癌中TGF一pl与Smad4呈显著负相关关系(p<0 .05),原因可能是Smad4缺失导致TGF一pl通路中断,反馈性引起TGF一pl增多。TGF一pl、Smad4与p27kiPI在胰腺癌中均无相关性,提示TGF一pl诱导的生长抑制有时也以与p27kiPI无关的形式起作用。