mTOR(the mammalian target of rapamycin)属于 PIKK(the phosphatidylinositol kinase-related kinase)超家族成员,作为 Ser/Thr 激酶发挥作用,进化上高度保守,调控细胞内各种合成代谢以及免疫活动。FKBP12(the FK506-binding protein 12)是一个12KD的小分子蛋白,它与免疫抑制剂rapamycin结合,负调控mTOR信号通路。FKBP12-rapamycin调控mTOR的具体机制目前尚未完全阐明。通过质谱分析,我们发现在氨基酸/血清存在条件下,FKBP12上的赖氨酸簇(K48/K53)可以被CBP乙酰化,乙酰化状态的FKBP12与mTOR的相互作用减弱。免疫共沉淀实验发现,乙酰化后的FKBP12与Rheb结合力增强,解除对mTOR的抑制作用从而促进其激酶活性。Rheb作为GTPase结合GTP时能够激活mTOR活性,通过质谱分析我们发现Rheb的第8位赖氨酸也能被CBP乙酰化,乙酰化后的Rheb(Ras homolog enriched in brain)与FKBP12相互作用增强,从而促进了 mTORC1的活性。有研究表明哺乳动物细胞中mTOR在先天免疫中起重要调控作用,但其具体机制仍不清楚。我们通过MALDI-TOF-MS发现mTOR磷酸化IRF3丝氨酸386位点,促进抗病毒活力。此外,我们在MEF细胞中构建FKBP12突变体的稳转细胞系,在病毒感染条件下,模拟乙酰化的突变体稳转细胞株抗病毒能力更强。这些结果表明,在氨基酸/血清存在条件下,乙酰化状态的FKBP12对mTOR的抑制作用减弱。mTOR通过磷酸化IRF3 386位点的丝氨酸来发挥抗病毒作用,而乙酰化后的FKBP12通过促进mTOR活力增强细胞的抗病毒功能。本课题首次揭示了 FKBP12乙酰化对mTORC1信号通路的重要调控作用,从细胞和分子水平验证了 FKBP12乙酰化的具体调控机制。此外,我们通过等多种技术手段证明IRF3是mTOR的一个新的靶点,揭示了 mTOR抗病毒的新机制。