【摘 要】
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目的：研究HIF-1α小干扰RNA(small interference RNA, siRNA)转染干扰缺氧诱导的OCM-1细胞前后HIF-1α和VEGF的表达情况,初步探讨HIF-1α在脉络膜黑色素瘤血管生成中的作用。
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目的：研究HIF-1α小干扰RNA(small interference RNA, siRNA)转染干扰缺氧诱导的OCM-1细胞前后HIF-1α和VEGF的表达情况,初步探讨HIF-1α在脉络膜黑色素瘤血管生成中的作用。方法：体外培养人脉络膜黑色素瘤细胞(OCM-1),在培养基中加入CoCl2溶液至终浓度为100μmol/L,用于模拟肿瘤内缺氧微环境。生物公司设计并合成si RNA(包括HIF-1α siRN、β-actin siRNA及阴性对照),以阳离子脂质体(LipofectamineTM2000)为载体介导合成的siRNA转染OCM-1细胞。RT-PCR及Western-blot分别在mRNA和蛋白水平检测转染前后HIF-1α和VEGF表达的变化。结果：与常氧组相比,单纯缺氧组HIF-11α mRNA表达无明显变化,差异无统计学意义(P>0.05); HIF-1a蛋白表达上调,其差异有统计学意义(P<0.01)；VEGFmRNA及蛋白表达均上调,差异均有统计学意义(P<0.01)。缺氧状态下,与阴性对照组相比,干扰组HIF-11α mRNA和蛋白、VEGFmRNA和蛋白的表达均下调,且差异有统计学意义(P<0.01)。结论：缺氧可诱导OCM-1细胞HIF-1α在蛋白水平表达上调,并通过转录激活VEGF的机制调控脉络膜黑色素瘤血管生成。合成的HIF-11α siRNA通过转染OCM1细胞成功地下调HIF-1α及其下游基因VEGI的表达。
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