石油作为人类的重要能源正在不断减少。在开发和利用石油的过程中，环境也不可避免的遭到了破坏。研究新的采油技术和石油污染修复技术将会很好的解决上述问题。　　 Geobacillus thermodenitrificans NG80-2分离子天津大港油田。通过前期基因组学和蛋白质组学的研究，发现NG80-2存在一条降解长链烷烃途径，ladA是这条途径中最重要的一个基因，它参与NG80-2降解长链烷烃的第一步反应，能把直链饱和烷烃(C15～C36)氧化为相应的伯醇。LadA嗜热，可溶，是单一组分酶，易于在E.coli中表达和纯化。这些优良性状使得LadA在工业合成、石油开采和石油环境污染等领域有很大的潜力。　　 本实验在前期实验的基础上通过定点突变、融合蛋白等分子生物学方法改造了LadA酶分子，构建了6个LadA突变克隆，5个LadA与辅酶依赖NADH的FMN还原酶克隆(区别在于ladA和其辅酶基因的链接臂密码子不同)，对这11个克隆进行了E.coli中表达条件的优化，最终纯化出两个LadA改造蛋白：F146C突变蛋白和一个LadA/依赖NADH的FMN还原酶融合蛋白，其他9个改造蛋白均以包涵体形式存在，需要进一步对其进行优化。构建了9个LadA突变酶在Pseudomonas fluorescens KOB2△1(一株缺失菌)的互补菌株。通过在C16中的培养9个互补菌株(LadA互补菌株为参考菌株；不加碳源C16培养基培养的菌株为负对照)和测定生长曲线，体内验证了这9个LadA突变活性，结果表明，这9个突变酶活性均高于野生型LadA活性。这些都为进一步研究LadA提供了一定的理论基础，也为构建优良的工程菌株解决石油资源匮乏和石油污染提供了研究借鉴。