三种丁香种子辐射诱变效应及变异株早期鉴定研究

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紫丁香(Syringa oblata)、暴马丁香(Syringa reticulata subsp.amurensis)、红丁香(Syringa villosa)因其开花繁茂、姿态优雅、抗逆性强,成为北方园林中不可或缺的植物。但在实际应用中存在花期短、叶色单一、观赏效果差等问题。因此,培育性状优良、观赏价值高的丁香品种具有重要意义。本研究以紫丁香、暴马丁香、红丁香不同状态的种子为试验材料,利用60Co-γ射线进行辐射处理后,研究辐射对种子的出苗率、幼苗成活率、变异率及形态的影响;观测形态特征和气孔形态、测定生理变化,初步筛选变异植株;运用ISSR分子标记技术对变异植株进行分子鉴定,并分析其遗传变异的程度,以期为丁香属植物的辐射诱变育种提供理论参考。研究结果表明:(1)50~100 Gy的低剂量辐射能够促进丁香提早出苗约1~3 d,且显著提高出苗率12.7%~28.9%;而200~300 Gy的高剂量辐射可使丁香种子出苗时间延迟1~5 d,出苗率显著降低33.3%~85.7%(P<0.05)。紫丁香、红丁香、暴马丁香的成活率在50 Gy处理后最高,变异率分别在50 Gy、200 Gy、100 Gy处理后最高。紫丁香的休眠、吸胀、即将萌动种子的半致死剂量分别为362.86 Gy、83.70 Gy、53.60 Gy,暴马丁香的分别为 189.20 Gy、136.83 Gy、111.15 Gy,红丁香的分别为 97.00 Gy、90.10 Gy、84.80 Gy。(2)50~100 Gy的低剂量辐射能够显著提高幼苗株高,促进叶片伸长、加宽,分别比对照增加 4.9%~84.2%、10.4%~19.1%、5.4%~13.4%;而 200~300 Gy 的高剂量辐射抑制幼苗株高、叶长、叶宽的生长,分别比对照降低11.7%~40.2%、1.9%~32.6%、9.8%~35.6%(P<0.05)。辐射诱变引起部分植株的表型变化,如叶裂加深、叶柄合生、叶面缺刻、叶片反卷、扭曲不对称等叶型变化和叶片变黄、黄绿嵌合的叶色变化。(3)筛选并构建出三种丁香突变群体,包括紫丁香变异株8株,突变性状包括植株矮化、节间距小、叶色深绿、叶片革质化、叶圆且叶脉清晰、茎粗、叶大且尖等;暴马丁香变异株5株,突变性状包括叶色浅绿、叶片细长、茎秆直立、叶缘呈波浪状等;红丁香变异株5株,突变性状包括植株高、分枝明显、叶片畸变等。通过观测气孔及保卫细胞、光合生理、内源激素含量等指标,发现不同变异株间存在显著性差异(P<0.05),且变异株株高越高,生长激素含量越高、光系统Ⅱ活性越高、光合能力越强,生长情况更好。(4)建立了分子水平的突变体鉴定体系,验证了 ISSR分子标记技术在丁香辐射诱变的有效性。紫丁香、暴马丁香、红丁香的ISSR多态性位点比率分别为94.1%、96.5%、87.8%,紫丁香变异株存在基于引物ISSR 58和ISSR 827的特异性标记,暴马丁香变异株具有基于引物UBC 840和ISSR 2-2的特异性标记,引物UBC 840和UBC 873能够作为红丁香变异株的特异性引物;遗传相似性系数与辐射剂量呈负相关关系,即辐射剂量越高,三种丁香的DNA变异程度越大。
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