【摘 要】
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本实验将整合有乙肝表面抗原主蛋白基因（HBsAg）的植物表达载体pCAMBIA1301通过根癌农杆菌介导转化番茄,诱导出丛生芽并筛选转基因植株,检测目的基因的转化情况和表达情况。实验
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本实验将整合有乙肝表面抗原主蛋白基因（HBsAg）的植物表达载体pCAMBIA1301通过根癌农杆菌介导转化番茄,诱导出丛生芽并筛选转基因植株,检测目的基因的转化情况和表达情况。实验主要取得了以下进展: 1.将植物表达载体pCAMBIA1301/HB转化农杆菌LBA4404,利用利福霉素（Rif）和卡那霉素（Kan）筛选出转化子,经PCR和双酶切鉴定,质粒转化成功,携带该载体质粒的农杆菌命名为LBA4404/pCAMBIA/HB。 2.樱桃番茄幼苗外植体在MS+6-BA2.0+IAA0.2培养基中能很好的诱导分化丛生芽;以25mg/L的潮霉素（Hyg）为选择压力能高效筛选出抗Hyg转化植株;转化植株在1/2MS+Hyg25生根培养基中生根正常,植株生长良好;经过炼苗后移栽花盆的存活率为100%。 3.用农杆菌LBA4404/HB浸染番茄幼苗外植体,以Hyg作为选择抗生物筛选出抗性转化植株,经PCR和Southern-blot检测证明所得转化植株全部为转基因植株。 4.粗提转基因植株的总蛋白,进行Western-blot和ELISA检测,结果证明目的基因HBsAg在番茄中正确表达,所表达的蛋白具有免疫原性。
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