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目的：本研究以不同浓度的抗坏血酸体外构建成骨细胞膜片，观测抗坏血酸对成骨细胞膜片物理性状的影响，检测在不同时间阶段成骨细胞膜片BMP-2、整合素β1mRNA表达量的情况，分析抗坏血酸对大鼠成骨细胞膜片成骨效应的影响，为无支架细胞膜片骨组织工程应用于口腔骨缺损的临床治疗提供一定的实验基础。 方法:选取新生SD大鼠乳鼠，取其颅盖骨，采用二次酶消化法原代培养大鼠成骨细胞，以差速贴壁法培养纯化成骨细胞。通过形态学观察、苏木精-伊红染色进行成骨细胞观察，通过碱性磷酸酶和茜素红染色进行成骨细胞鉴定。采用机械刮取法，以不同浓度抗坏血酸体外构建成骨细胞膜片，实验组分为A组、B组、C组（完全培养基中分别加入15㎎/L、50㎎/L、85㎎/L的抗坏血酸），对照组为D组（完全培养基中不加抗坏血酸），各组成骨细胞以2×106cells/ml接种于6孔培养板，均高密度连续培养，分别于第一周和第二周通过镊子轻提、管状成形和可缝合性检测等方法进行成骨细胞膜片的机械性能观测；并于第一周和第二周，采用实时荧光定量PCR检测成骨细胞膜片中BMP-2、整合素β1mRNA的表达情况。 结果：所培养的细胞经过苏木精-伊红染色及倒置相差显微镜观察后，细胞形态符合成骨细胞形态学特征。经过碱性磷酸酶及茜素红染色后，结果符合成骨细胞特性。体外可借助管状支架构建一定管状形态的成骨细胞膜片。基因检测结果显示：组间比较时，第一周和第二周成骨细胞膜片中BMP-2mRNA表达量实验组均高于对照组，其中，以50㎎/L组表达量最高（第一周P＜0.05；第二周P＞0.05）；第一周和第二周成骨细胞膜片中整合素β1mRNA表达量实验组均低于对照组（第一周和第二周均P＜0.05）。组内比较时，各组成骨细胞膜片中BMP-2和整合素β1mRNA表达量第二周均高于第一周（BMP-2各组P＜0.05；整合素β1BD两组P＜0.05，AC两组P＞0.05）。 结论：本次研究采用机械刮取法能够获得具有一定强度的成骨细胞膜片。抗坏血酸对成骨细胞膜片的构建具有促进作用，其中，以50㎎/L抗坏血酸作用下的成骨细胞膜片的成骨效应最显著。在一定时间段内，成骨细胞膜片中BMP-2和整合素β1mRNA表达量与时间呈正相关关系。