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研究背景：微小RNA（microRNA，miRNA）是一类大小为20～25个核苷酸（nucleotide， nt）的非编码小RNA。成熟的miRNA与其靶信使RNA（messenger RNA，mRNA）完全或不完全配对后，通过切割或抑制靶mRNA的转录后翻译，参与调节生物的发育、细胞的分化[1]、增殖[2]和凋亡[3]等。近年研究表明：miRNA与肿瘤的发生、发展关系密切，某些miRNA在胶质瘤中呈特异性表达。最近研究发现，miR-7在多种肿瘤是低表达[4-6]，但有关miR-7在胶质瘤方面的研究很少。研究目的：1.研究miR-7对胶质瘤细胞增殖、周期、凋亡侵袭功能的影响，并对其机制进行初步探讨。2.初步探讨miR-7抑制人胶质瘤的侵袭能力的可能机制，为今后靶向治疗胶质瘤疾病提供新的靶点。研究方法：1.功能研究：选取人胶质瘤细胞系U87和U251细胞，培养于含10%新生牛血清的DMEM（Gibco公司）培养基，并置于37℃、5%CO2孵箱中，取对数生长期细胞实验。实验分为特异性miRNAs组，阴性对照组和空白对照组。委托上海吉玛公司合成特异性miRNAs寡聚核苷酸，转染U87和U251胶质瘤细胞。通过噻唑蓝（MTT）实验、细胞划痕试验、流式细胞仪（FCM）检测和Transwell实验，观察上调miR-7表达后对胶质瘤细胞增殖、周期、凋亡和侵袭能力的影响。2.机制研究：根据生物信息学数据库预测结果，筛选miR-7的候选靶基因，应用荧光素酶报告实验对候选靶基因进行验证。并用PCR和Western blot方法，检测过表达miR-7后相关基因及蛋白的表达变化，并在胶质瘤组织中验证miR-7与靶基因的相关性。研究结果:1.过表达miR-7抑制胶质瘤细胞增殖。2.过表达miR-7通过抑制CyclinD1阻滞胶质瘤细胞周期在G1期。3.过表达miR-7通过调控Bcl-2家族促进胶质瘤细胞凋亡。4.过表达miR-7下调MMP家族蛋白的表达从而抑制胶质瘤的侵袭。5. miR-7靶向作用FAK3′UTR。6.在胶质瘤组织中miR-7和FAK表达呈负相关。研究结论：1.过表达miR-7可以抑制细胞增殖、诱导凋亡，阻滞细胞周期在G1期，并抑制迁移和侵袭能力。miR-7在胶质瘤中可能发挥着肿瘤抑制因子作用。2.在胶质瘤细胞中， miR-7直接调控潜在的靶基因FAK的表达抑制MMP-2和MMP-9的表达。在胶质瘤组织中miR-7和FAK表达呈负相关。miR-7/FAK信号通路参与抑制胶质瘤细胞的侵袭。miR-7有望成为胶质瘤基因治疗的侯选靶点。