富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白(secrete.protei.acidi.an.ric.incysteine，SPARC)是一种小分子酸性糖蛋白，通过与细胞因子、细胞膜表面蛋白及胞外基质蛋白相互作用而表现出多种生物活性。目前，国内外对SPARC的研究多数集中在脊椎动物上，而对无脊椎动物的研究较少。本研究从家蚕蛹cDNA文库中获得一条家蚕富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白(BmSPARC)基因的cDNA序列，利用生物信息学方法对此序列进行开放阅读框(ORF)、序列同源性等分析。BmSPARC基因的cDNA序列全长162.bp，含有1个95.bp的ORF，编码317个氨基酸残基，预测分子量为37.3.kD。同源性比较表明该基因编码蛋白质的氨基酸序列在无脊椎动物中具有较高的保守性。将B.SPARC基因片段克隆到表达载体pET-28a(+)相应的酶切位点上，得到重组质粒pET-28a(+)-BmSPARC，经PCR、酶切鉴定以及测序分析证实重组正确。将该重组子转化E.col.BL2.(DE3)，工程菌经IPTG诱导表达后，裂解菌体作SDS-PAGE分析，与阴性对照相比在4.kD左右的位置有一条特异性蛋白条带。重组蛋白以包涵体的形式存在，故超声裂解菌体，分离包涵体并洗涤、溶解，1200.rpm离心所得的上清采用亲和层析的方法纯化融合蛋白。经FPLC反相柱层析进一步纯化后，再进行质谱分析，结果显示该融合蛋白的分子量为41.38.kD，与理论值41.2.kD(融合标签3.8.kD，BmSPARC37.3.kD)相符。将纯化的融合蛋白免疫新西兰兔制备多克隆抗体，ELISA检测该抗体血清的效价可达到1:25600以上。通过亚细胞定位发现该蛋白主要存在于细胞质中。利用实时荧光定量PCR的方法，对BmSPARC在家蚕不同发育时期、不同组织中的mRNA的量进行比较，并采用Wester.blotting方法对BmSPARC蛋白的表达进行分析。实验结果表明，BmSPARC在卵期和丝腺组织无表达，而在5龄幼虫、蛹、蛾发育时期及5龄期的头部、脂肪体、中肠、马氏管、卵巢、表皮和气门等7个组织中均有不同程度的表达，其中蛾期和卵巢的表达量较高。本研究为进一步探讨BmSPARC基因在家蚕生长、发育过程中的生物学功能打下了良好的基础。