Per1、Per2在体外培养的胶质瘤细胞和正常细胞中的表达的差异性研究

来源 :宁夏医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wujingtao
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自然界中动植物以及人类的生理活动、生活习性都有着白天和黑夜的不同。这种近似24小时的近日节律性是由内在的生物钟产生的。这种生物钟的节律性振荡是由一系列生物种基因组成的正负反馈环路。Per1、Per2作为核心生物钟基因在近日节律的产生和维持当中是至关重要的。Per1、Per2基因的突变或缺失,表达的异常可以引起生物昼夜节律紊乱或消失,继之导致疾病的发生或促进疾病的发展,促使过早的衰老、肿瘤的发生。而通过转基因技术增加Per1、Per2基因在肿瘤细胞中的过表达可以抑制肿瘤细胞生长促进肿瘤细胞凋亡。恶性胶质瘤是颅内最常见的中枢性神经系统肿瘤,手术难以全切,放化疗由于副作用较大,不能很好的发挥作用。研究背景和目的研究发现生物钟基因Per1、Per2的突变或缺失与乳腺癌、肺癌及淋巴瘤等恶性肿瘤的发生、发展有密切的关系。目前尚未有有关胶质瘤与生物钟基因之间相关的研究。本实验目的在于探讨胶质瘤与生物钟基因Per1、Per2之间的关系。试验方法进行细胞株的培养,PMA诱导细胞产生生物钟基因的表达。取不同时间点的细胞,采用免疫组织化学法和RT-PCR检测体外培养的胶质瘤细胞和正常细胞的Per1、Per2基因表达的差异。结果对免疫细胞化学结果用Image pro-Plus进行处理,方差分析结果显示PMA刺激诱导的NIH3T3细胞中Per1、Per2基因的表达表现为近日节律,而PMA刺激诱导的C6细胞中Per1、Per2基因的表达不表现为近日节律,NIH3T3细胞中Per1、Per2基因的表达与C6细胞中Per1、Per2基因的表达有显著性差异。采用RT-PCR半定量检测NIH3T3细胞与C6细胞中Per1、Per2基因的mRNA,实验结果处理得出了同样的结果。结论C6细胞和NIH3T3细胞内均存在Per1和Per2基因的表达。Per1和Per2基因在NIH3T3细胞内呈近日节律性表达,而在C6细胞内Per1和Per2基因的表达不表现为近日节律且表达水平较低。
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