【摘 要】
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通过有机提取,硅胶柱层析及HPLC制备柱层析等方法,从荧光假单胞菌M18的发酵液中分离纯化到一种黄色物质,经过紫外色谱、质谱、和核磁共振图谱分析发现它为抗生素藤黄绿菌素.
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通过有机提取,硅胶柱层析及HPLC制备柱层析等方法,从荧光假单胞菌M18的发酵液中分离纯化到一种黄色物质,经过紫外色谱、质谱、和核磁共振图谱分析发现它为抗生素藤黄绿菌素.并进一步得到Plt的浓度与峰面积的线性回归方程y=6602278.275*x+179846.667,r=0.9924,Q<,r>//Q<,z>=98.49﹪,F=13.69.根据Genebankk中rsmA基因最为保守的区域设计引物,以该PCR产物为探针筛库,选出阳性克隆后,Southern杂交确定rsmA及其附近基因所在的大片段,克隆入pBluescript SK,通过体外基因重组,将卡那霉素抗性基因定位整合到M18菌株的rsmA基因内,使rsmA基因失活,将失活的rsmA基因失活克隆到自杀质粒中,通过同源重组,得到rsmA基因突变的M18菌株.并揭示rsmA基因参与M18菌株的糖原代谢过程,rsmA基因负调控PCA的产生.
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