聚噁唑啉纳米载体的制备及其在肿瘤治疗方向的研究

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癌症是威胁人类健康的首要顽疾之一。传统的化学疗法和新型的免疫疗法在癌症治疗领域中占据着重要地位。然而传统的化疗药物和免疫疗法中的免疫刺激药物和小分子抗原在体内治疗中存在选择性差、生物利用度低和系统毒性高等缺点。已有研究表明利用纳米载体将小分子药物或抗原包封起来可以有效提高小分子在体内的选择性、生物利用度和肿瘤治疗效果。本论文以聚(2-噁唑啉)(POx)材料为基础,针对疏水小分子的特殊化学结构,设计高效且普适的载体,用于小分子化疗药物、抗原和小分子免疫佐剂在体内的传输,并对担载药物后的纳米制剂的肿瘤治疗效果进行了评估。本论文的研究内容和主要结论如下:(1)以POx为基础,设计合成了含有不同侧基基团的两亲性POx共聚物,利用不同的侧基基团与药物之间的相互作用,提高纳米载体疏水药物的担载效率。根据疏水性的不同,实验选取了紫杉醇、曲尼斯特、塞来昔布、阿霉素等药物用于不同载体的载药量测试。研究结果表明,静电相互作用可以有效提升纳米载体对药物的担载能力,而π-π作用只会提高载体对芳香碳含量高的塞来昔布等药物的担载能力。此外在生物相容性测试中,四种官能化POx纳米载体均未显示出明显的细胞毒性和溶血现象。放置稳定性实验结果显示,大部分载药纳米胶束在室温放置一周后依然可以保持稳定的纳米胶束形态。综上实验结果表明,通过对POx纳米载体进行相对的官能团改性,可以对我们所选择的多种药物进行高效的担载,形成的载药纳米胶束在室温下可以稳定存在,为后续的纳米药物的发展提供了一种新的选择。(2)前一体系实验证明,以聚(2-丁基-2-噁唑啉)为疏水链的POx纳米载体是适紫杉醇(PTX)优选载体,但这种载药胶束载体在体内的循环时间短,无法有效提高PTX在体内的生物利用度。针对这种情况,我们创新性地在POx载体侧基上引入了可以相互交联的碱基,设计合成了一对碱基互补的核交联两亲性POx共聚物用于担载PTX,这种胶束的氢键交联中心可以高效的担载PTX,并且具有核交联结构的载药胶束具有更高的稳定性、更小的胶束尺寸和更高的PTX担载力。在荷瘤小鼠的生物分布实验中,核交联胶束在肿瘤组织的富集量是游离PTX的8.9倍;在肿瘤抑制实验中,核交联载药胶束对两种乳腺癌的肿瘤抑制率均高于80%。综上实验结果表明,具有核交联结构的POx共聚物可以高效担载PTX,且这种核交联载药胶束独特的稳定性可以有效抑制肿瘤的生长,为POx作为医用纳米药物载体提供了理论基础。(3)治疗型肿瘤疫苗可作为一种新型肿瘤免疫疗法为传统治疗方案无法治愈的肿瘤提供了一种理想的选择。但其中使用的抗原和佐剂大多为小分子,无法顺利地通过皮下转运至淋巴结引起适应性免疫应答。针对这一问题,我们以POx为基础,设计合成了含有不同叔胺基团作为侧基的POx纳米疫苗载体,用来同时担载OVA抗原肽以及免疫刺激性佐剂R848。这些以叔胺官能团为侧基的POx载体可以高效担载OVA抗原肽以及R848。体内实验结果证明,以叔胺改性的POx为载体的纳米疫苗可以在淋巴结内高效地富集,且具有高效激活淋巴结内的树突状细胞(DC)和抗原交叉呈递能力。在B16-OVA荷瘤小鼠的抑瘤实验中,以高哌啶改性的POx为载体的纳米疫苗具有最强的肿瘤抑制作用,治疗组中有50%小鼠被完全治愈。综上实验结果证明,我们合成的叔胺改性的POx可以同时担载OVA抗原肽和R848并实现抗原和佐剂的同时递送。这种以POx为载体的纳米疫苗对B16-OVA小鼠黑色素瘤的有效抑制为POx作为纳米疫苗载体应用于医疗领域提供了有力的数据支持。
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