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目的:上皮-间质转化(EMT)与肿瘤的发生及一系列恶性进展密切相关,micro RNA(mi RNA)可通过调节相关基因调控EMT。本研究主要观察mi R-205-5p对耐顺铂鼻咽癌细胞EMT的调控作用,并明确其作用机制,以期为开辟新的鼻咽癌临床治疗途径提供理论和实验依据。方法:1.mi RNA芯片技术检测耐顺铂鼻咽癌HNE1/DDP细胞和敏感株细胞HNE1中mi RNAs表达的变化,筛选出表达差异显著的mi RNAs,并通过实时荧光定量聚合酶链式反应(q RT-PCR)进行验证;2.用Lipofectamine 2000将mi R-205-5p mimic或mi R-205-5p inhibitor转染HNE1细胞或HNE1/DDP细胞,以改变细胞内mi R-205-5p的表达水平;3.MTT法检测鼻咽癌细胞增殖及存活情况;集落克隆形成实验检测细胞集落形成能力;Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡情况;4.划痕愈合实验检测细胞水平运动能力;Transwell小室实验检测细胞的体外迁移及侵袭能力;5.倒置显微镜观察细胞生物学形态的变化;Western blot及q RT-PCR检测细胞内EMT相关标志分子E-cadherin、N-cadherin、Vimentin、MMP-2、MMP-9及EMT诱导转录因子Snail、Slug的蛋白水平及m RNA水平的变化;6.使用Target Scan及STRING analysis等软件预测mi R-205-5p的潜在靶基因,并检测mi R-205-5p对靶基因的调控作用;7.探索mi R-205-5p调控EMT的相关信号通路。结果:1.HNE1/DDP细胞相对于HNE1细胞对顺铂具有耐药性,耐药指数为4.95。2.mi RNA芯片技术检测了HNE1和HNE1/DDP细胞中mi RNAs的表达,结果显示mi R-205-5p在HNE1/DDP细胞中显著高表达。3.MTT、Annexin V-FITC/PI双染及Western blot结果表明,下调HNE1/DDP细胞中mi R-205-5p的表达后,顺铂对HNE1/DDP细胞的毒性显著增强,HNE1/DDP细胞对顺铂敏感性增强。4.通过在HNE1/DDP细胞内转染mi R-205-5p inhibitor,在HNE1细胞内转染mi R-205-5p mimic,调控两株细胞中mi R-205-5p的表达水平。上调HNE1细胞内mi R-205-5p的表达,可显著增强细胞的增殖、侵袭和迁移能力,诱导细胞发生EMT;抑制HNE1/DDP细胞内mi R-205-5p的表达可显著抑制细胞的增殖、侵袭和迁移能力,逆转细胞的EMT进程。5.PTEN为mi R-205-5p的下游靶基因,抑制PTEN的表达可促进鼻咽癌细胞的增殖、侵袭和迁移,并可抵消mi R-205-5p inhibitor的作用。6.mi R-205-5p通过PI3K/AKT信号通路调控EMT,阻断PI3K/AKT信号通路可有效阻断mi R-205-5p mimic对HNE1细胞侵袭和迁移的促进作用及对EMT的调控作用。结论:1.耐顺铂鼻咽癌HNE1/DDP细胞中mi R-205-5p显著高表达,且与细胞发生EMT密切相关。2.过表达mi R-205-5p可促进细胞侵袭、迁移及EMT的发生;相反,抑制细胞内mi R-205-5p的表达可逆转鼻咽癌细胞EMT进程并增强HNE1/DDP细胞对顺铂的敏感性。3.mi R-205-5p通过PI3K/AKT信号通路靶向PTEN发挥对鼻咽癌细胞EMT的调控作用。