论文部分内容阅读
目的：观察索拉非尼（sorafenib）联合奥曲肽（octreotide）在体外对人肝癌细胞（hepatic cell cancer）株HepG2的抑制作用并探讨其机制。方法：采用不同浓度梯度的索拉非尼、奥曲肽单独和联合作用于人肝癌细胞株HepG2，分别于24、48、72h用新一代细胞计数试剂盒（CCK-8）测定各组细胞的增殖抑制效应，流式细胞仪测定HepG2细胞的凋亡率，在荧光显微镜下观察细胞的生长情况；并运用酶联免疫吸附法（ELISA）测定细胞培养上清液中的血管内皮生长因子（VEGF）的表达，蛋白质印迹法（Western blot）测定细胞中髓样细胞白血病-1（Mcl-1）、细胞外调节蛋白激酶（ERK）1/2、p-ERK1/2的表达。结果：索拉非尼、奥曲肽单独使用和联合使用均对HepG2细胞具有抑制作用，并诱导其凋亡，联合用药组抑制效果优于单独用药组（P<0.05）。荧光显微镜观察显示，联合用药组和单独用药组细胞膜上均出现代表细胞早期凋亡的较敏感标志物磷脂酰丝氨酸，而空白对照组不显著。联合用药组VEGF表达水平为（10.31±4.69）pg/ml，低于索拉非尼组[（22.73±5.88）pg/ml]、奥曲肽组[（25.46±3.45）pg/ml]及空白对照组[（57.15±6.32）pg/ml]，F=1019.725，P值均<0.05。Western blot法显示，各组ERK1/2表达水平差异并无统计学意义（P>0.05）；与正常对照相组比，索拉非尼、奥曲肽及联合用药组的p-ERK1/2表达均减少（F=2.401，P<0.05），联合用药组表达水平低于单独用药组（P值均<0.05）；奥曲肽组Mcl-1的表达水平与对照组差异无统计学意义，索拉非尼组和联合组的表达水平低于正常对照组（P值均<0.05），联合用药组的Mcl-1表达水平低于各单独用药组（P值均<0.05）。结论：索拉非尼、奥曲肽均可抑制人肝癌细胞HepG2增殖，并诱导其凋亡，联合应用效果更为显著；其机制可能与二者协同抑制VEGF的表达，并下调抗凋亡蛋白Mcl-1及p-ERK1/2的表达有关。