RSV在昆虫介体灰飞虱体内的卵传机制及其非水稻寄主的初步研究

来源 :扬州大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yangchao2005
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通过对携带水稻条纹病毒(Rice stripe virus, RSV)的灰飞虱(Laodelphax striatellus Fallén,SBPH)卵巢进行超薄切片透射电镜直接观察和超薄切片免疫电镜定位观察,确定病毒粒子在灰飞虱卵巢中的分布情况,初步探讨RSV在介体灰飞虱体内的卵传机制。通过蛋白免疫印迹法探讨灰飞虱体内的传毒相关蛋白。2005年春季江苏苏北地区大片麦田出现类似RSV病状的田间症状,对此进行田间调查、实验室鉴定,确定病原是否为RSV。收集RSV的野生禾本科寄主种子进行室内灰飞虱接种传毒试验,确定RSV野生禾本科寄主的获毒潜能。对春季麦田中的RSV野生禾本科寄主进行带毒率测定。超薄切片透射电镜直接观察结果显示,在卵巢的生殖区中有正在发育的卵细胞,被滤泡细胞所包围。在滤泡细胞中聚积了许多形状各异的内含体。这些内含体电子密度高,与细胞质明显不同,放大后呈砂粒状结构或是呈平行排列的丝状结构,与在水稻中电镜观察到的RSV粒子团块极为相似。可以认为病毒粒子成束状紧密排列成团块,这些病毒团块被横切后呈砂粒状结构,纵切后呈平行排列的丝状结构,斜纵切则砂粒状结构和细丝状结构同时出现,可清晰地看到细丝直径约为3-8 nm。通过超薄切片免疫电镜可观察到在卵壳片层上分布有大量的金颗粒,散布比较均匀,即说明在卵壳上分布着RSV粒体。在消化道的中肠细胞、卵细胞中散布着金颗粒,表明在这两处都存在病毒粒子,与前人的报道一致。卵壳是由滤泡细胞分泌的卵壳蛋白堆积而成,因此卵壳中的RSV来自于滤泡细胞,进而可以推测滤泡细胞中的病毒粒子会随着滤泡细胞向卵细胞分泌营养物质时进入卵细胞。在东海、阜宁、大丰等地的田间对发病严重的麦田进行症状、灰飞虱发生量、病株分布情况等调查,以及病株与灰飞虱发生量的相关性分析,经实验室免疫学检测、RT-PCR分子生物学检测确定危害江苏省苏北地区大面积麦田的病原物为RSV。该病毒是由上一年从水稻上获得RSV的越冬代灰飞虱早春危害麦苗,导致RSV在小麦上大面积发生。室内野生禾本科寄主灰飞虱接种传毒试验显示稗草、旱稗、狗尾草、升马唐获毒率较高,达到38%-50%,表明野生禾本科寄主有获毒的潜在可能性,即这些野生禾本科寄主是RSV的潜在桥梁寄主。
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