蛋白质组学研究在功能基因组时代发挥着越来越重要的作用。双向电泳是其中的关键技术之一。花生(Arachis hypogeae L .)容易受到黄曲霉菌(Aspergillus flavus)侵染和黄曲霉毒素(Aflatoxin)的污染。当湿度、温度等环境条件适合时,花生在收获前、收获中和收获后的储藏、运输及加工过程中都可能被黄曲霉毒素污染。极大影响了国民经济的提高。同时在黄曲霉菌侵染过程中,干旱的环境会更有助于病菌的侵入。明确花生果皮对黄曲霉菌的抗性机理,阐明其抗病基因功能,对实现花生高产、抗病分子育种具有十分重要意义。很多学者在黄曲霉菌侵染花生的检测及防治方法、品种抗性鉴定方法、电镜观察超微结构、抗性生理机制方面、分标记及基因克隆连同原核表达进行了研究。但关于花生果皮方面的研究不是很多,然而在基因和蛋白表达水平上对花生果皮侵染黄曲霉菌机制的研究就更是很少,特别是蛋白质组学方面的研究。为更进一步了解花生果皮侵染黄曲霉菌机制提供了一些依据。本研究以抗黄曲霉菌花生种质闽花6号花生果皮为试验材料,以双向电泳技术联用质谱技术为试验方法,对花生植株进行干旱胁迫的同时,协同黄曲霉菌胁迫花生果皮过程中的病程相关蛋白、植物凝集素蛋白、以及其它作用的差异蛋白进行质谱分析和鉴定,这些信息有利于在分子水平上研究花生果皮与黄曲霉菌的互作机制,为进一步克隆花生果皮与黄曲霉菌互作中的相关重要基因及功能分析、以及为研究抗黄曲霉菌的花生新品种奠定基础。具体结果如下:1应用蛋白质组学研究技术,分析了花生果皮在不同处理下的病程相关蛋白的变化。通过观察双向电泳图谱可知,聚集在同一区域的几个低分子量蛋白显著差异表达。通过MALDI-TOF-TOF-MS/MS鉴定及数据库检索,鉴定其为抗性相关蛋白(PR10蛋白)。研究结果表明:磷酸化的PR10蛋白在黄曲霉菌和干旱胁迫过程可能起到主要作用。这些信息有利于在分子水平上研究花生果皮与黄曲霉菌的互作机制,为研究花生过敏机制及设计低致敏原疫苗奠定基础。2对花生果皮进行黄曲霉菌以及干旱胁迫过程中的植物凝集素相关差异蛋白进行分析和鉴定。分析了花生果皮侵染黄曲霉菌的不同处理的蛋白质组变化,共有23个植物凝集素相关的差异蛋白点。本研究中凝集素蛋白可能参与了黄曲霉菌侵染花生果皮过程,有助于了解果皮中凝集素蛋白对黄曲霉菌的抗性机制,为以后的抗性育种奠定基础。3对花生植物进行干旱胁迫的同时,使用黄曲霉菌胁迫花生果皮过程中的差异蛋白进行分析和鉴定。应用蛋白质组学研究技术,分析了花生果皮侵染黄曲霉菌的3个不同时期的蛋白质组变化,共鉴定了46个差异蛋白点。通过MALDI-TOF-TOF-MS/MS鉴定及数据库检索,鉴定出25个蛋白点。这些鉴定出的差异蛋白质与物质与能量代谢、防卫过程、运输过程、次生代谢过程、细胞生物转化等生理过程密切相关,可能参与了花生果皮抗黄曲霉菌侵染过程。