金属硫蛋白普遍存在于生物体内,具有低分子量、富含半胱氨酸、诱导性强等特点。金属硫蛋白具有很强的金属结合能力和氧化还原能力,在生物体内参与细胞内金属水平的稳态调节、重金属解毒、清除自由基、抵抗电离辐射等,具有较强的生物学功能。本论文通过同源克隆和RACE等方法克隆了黄颡鱼MT全长cDNA序列。该序列全长381 kb,开放阅读框(Open Reading Frame, ORF)长度为183 bp,可以编码60个氨基酸,推导的氨基酸序列与其他已知鱼类MT具有80%以上的相似性(identity),序列比对和聚类分析表明黄颡鱼MT与斑点叉尾鮰MT氨基酸序列相似性最高(91%)。理论分子量为6080Da。在其编码的氨基酸序列中半胱氨酸(Cys)含量最高,占33.3%,其次是丝氨酸(Ser)占18.3%,赖氨酸(Lys)占11.67%,不含组氨酸和芳香族氨基酸。对其编码的氨基酸序列进行分析发现该序列有脊椎动物金属硫蛋白的保守序列模式cys-x-cys、cys-x-x-cys和cys-x-cys-cys。在半定量试验中,用β-actin基因做内参,用比较电泳条带亮度比值得方式进行分析,表明MT会受到Cd2+的诱导表达并与其浓度相关,MT在肝脏中表达量相对较高。本论文采用基因重组技术,将黄颡鱼MT基因重组入原核表达载体pMAL-c2x中,该载体含有一个麦芽糖结合蛋白(MBP)基因,便于融合蛋白表达后的纯化。将重组质粒转入E.coli BL21中进行体外表达,SDS-PAGE分析表明,经IPTG诱导后成功地表达了目的融合蛋白MBP-MT。对MT的重金属离子(Zn2+,Cd2+)耐受性进行了研究,转化MT的大肠杆菌BL21与对照相比,对重金属耐受性都得到了增加。