为了给扩大脂肪酶的生产源提供基础性材料，本文从细菌的筛选，脂肪酶的纯化、固定化以及其相关性质等方面展开研究，具体工作如下： 从贵阳市附近的炼油厂、蔬菜园、粮油市场、贵州师范大学食堂采集土壤样品，经过初筛、复筛、分离和鉴定，从78份土样中共筛选到24株脂肪酶产生菌，这些菌株发酵液的脂肪酶活性为1.0～13.2U/mL，其中从炼油厂土样中筛选到的A7菌株的产脂肪酶活性最高。 分别以不同碳源和氮源培养A7菌株，结果表明：细菌发酵产脂肪酶的最佳碳源和最佳氮源分别是蔗糖和酵母粉。通过正交试验对菌株A7液体发酵产脂肪酶培养基进行了优化，确定其最适产酶发酵培养基为(％)：酵母粉3.5g，蔗糖1g，菜子油2mL，硫酸镁0.25g，磷酸氢二钾0.2g，硫酸铵0.3g，pH8.0；此外，还发现菌株A7的最佳培养时间为48h。 细菌发酵液经过饱和硫酸铵沉淀和Sephadex G-75排阻层析两步处理，脂肪酶活回收率分别为49.32％和22.32％；所得脂肪酶溶液经SDS—PAGE电泳检测，得到单一的电泳条带；根据电泳结果计算得到细菌菌株A7所产脂肪酶的分子量为29.5kd。 对脂肪酶分别进行物理吸附和包埋法固定化研究发现，包埋法的效果明显好于物理吸附法。其中高岭土—海藻酸钠结合法效果最好，其相对酶活力达到62.55％，比硅藻土吸附法高出近30个百分点。通过比较游离脂肪酶和固定化酶的性质研究发现，脂肪酶在固定化处理后最适温度没有发生变化，均为40℃；而最适pH值则由游离态的8.0降低为固定化后的7.5。另外还发现固定化酶比游离态脂肪酶更稳定，重复使用5次后，脂肪酶活力从30U/g降到15.48U/g，每次反应时间为15min，所以固定化酶的半衰期为75min(5×15)。