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人类免疫缺陷病毒是艾滋病的病因。到目前为止,还没有安全有效的治疗办法,以预防为主,普及HIV抗原抗体及病毒的检测,尽可能早的发现感染者,早期干预,防止传播。其中,HIV-P24抗原是HIV的核心蛋白,在病毒的包装及成熟过程中起非常重要的作用。人体初次感染HIV,最早在患者血清中出现HIV抗原,2~3周可进行P24抗原的检测。HIV-P24抗原是能从血清中最早检测出的免疫标志物,HIV-P24蛋白早期准确检测有利于早期诊断,可以缩短“窗口期”,同时P24检测可预测病程,是跟踪HIV进程上的有效手段。因此,建立一种快速准确检测P24抗原的方法是很有必要的。适配体是人工体外筛选得到的一段寡核苷酸片段,由于其特殊的二级结构及三级结构,能与各种物质结合,如:抗原、抗体、病毒、金属离子等。他们之间的结合类似于抗原抗体的结合,因此,核酸适配体有“化学抗体”之称,但它有一些优于抗体的特性:高的亲合力和强的特异性;易制备及化学修饰;靶标范围广泛;分子小及无免疫原性。因此成功筛选出HIV-P24抗原特异性的适配体,有望建立一种基于该适配体的快速、准确、高效检测HIV-P24抗原的方法,可缩短检测的窗口期,为艾滋病的早期快速准确诊断奠定基础。以羧基化琼脂磁珠为靶标结合介质,HIV-P24抗原为靶标分子,用消减SELEX技术筛选HIV-P24抗原的特异性寡核苷酸适配体;后期又将筛选富集的次级文库进行大肠杆菌DH5α转化,并挑取阳性克隆进行交错PCR检测及序列测定。在整个HIV-P24抗原特异性寡核苷酸适配体筛选过程中对实验中磁珠投入量、洗涤试剂及次数、结合时间、非靶标分子的替换等因素进行调整,最终确立了一套较为完整的高效筛选此类适配体的方案。利用消减SELEX技术,经过七轮的筛选,成功筛选获得了HIV-P24抗原的特异性寡核苷酸适配体。将筛选得到的适配体转化及克隆,挑取克隆团,通过交错PCR技术鉴定阳性克隆,并对其特异性进行鉴定,最终得到了5个与HIV-P24抗原有较强特异性的克隆,获得了测序结果。消减SELEX技术筛选到的HIV-P24抗原特异性寡核苷酸适配体,具有强的特异性,有望建立一种基于HIV-P24抗原特异性寡核苷酸适配体的快速、高效、准确检测HIV-P24抗原的方法,可缩短检测的窗口期,为艾滋病的早期快速准确诊断奠定基础。