【摘 要】
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实验目的双歧杆菌是人和动物肠道内重要的生理菌,其表面分子脂磷壁酸(LTA)在体内、外均能诱导肿瘤细胞凋亡,但诱导肿瘤细胞凋亡的信号途径尚不清楚。本实验通过研究经双歧杆
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实验目的双歧杆菌是人和动物肠道内重要的生理菌,其表面分子脂磷壁酸(LTA)在体内、外均能诱导肿瘤细胞凋亡,但诱导肿瘤细胞凋亡的信号途径尚不清楚。本实验通过研究经双歧杆菌LTA处理后,结肠癌LoVo细胞Toll样受体的表达以及在LTA诱导肿瘤细胞凋亡中的作用和其它相关信号分子的变化,初步探讨双歧杆菌脂磷壁酸诱导肿瘤细胞凋亡的可能信号途径。实验方法1. LTA体外诱导结肠癌LoVo细胞凋亡,显微镜下观察细胞的形态学改变,同时用Annexin V检测肿瘤细胞的凋亡率;LTA处理肿瘤细胞前后,检测TLR2和TLR4在细胞表面表达的变化,最后用相应的TLR2和TLR4封闭抗体处理肿瘤细胞,再检测经LTA处理后,LoVo细胞凋亡率的变化。2. LTA体外诱导结肠癌LoVo细胞凋亡,用RT-PCR检测FADD和MyD88两个信号分子mRNA水平的变化,Western blot分析FADD信号分子蛋白水平的变化;用Caspase抑制剂处理LoVo后,流式细胞仪检测经LTA诱导后肿瘤细胞凋亡率的变化,并用Caspase-8的特异性底物,检
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