夏枯草为唇形科夏枯草属植物夏枯草的干燥果穗,因“此草夏至后即枯”得名。目前的研究表明夏枯草多糖有降压及降血脂作用,抗菌、抗病毒作用,降糖作用,抗炎及免疫抑制作用,抗肿瘤作用。由于夏枯草有重要的临床应用价值和开发利用价值,是一种有潜力的药物资源,而越来越引起人们的关注。本实验以夏枯草为原料,针对目前夏枯草多糖的研究现状,从以下几方面展开研究工作:1)采用90℃热水提取,并对提取条件进行了优化,得到夏枯草粗多糖,并经分级醇沉得到几个级分;然后测定了醇沉后的活性成分AEPS1中的硫酸基含量和蛋白质含量;经阴离子交换柱层析、凝胶柱层析对粗多糖AEPS1进行分级纯化;通过高效凝胶过滤色谱测得了AEPS1的主要组分PLS3的重均分子量为8.3×105 Da,并对PLS3进行了红外分析和其比旋光度测定,得到了其初步结构。2)对传统苯酚硫酸法进行改进,在用苯酚-硫酸法测定多糖含量的过程中,考察了硫酸的加入方式和加入硫酸后的放置温度对吸光度和灵敏度的影响:随着温度的升高,两条线趋于靠拢,在110℃时几乎重合,确定最佳加入方式为垂直加入,加入硫酸摇晃后最佳油浴温度为110℃。并按各多糖的单糖组成配置相应的混合标样,根据相应的标准曲线测得夏枯草多糖和其纯品PLS3的总糖含量,减小了误差、提高了灵敏度。因此,改良后的苯酚硫酸法为糖含量的测定提供了更为有效的方法。并用改良的苯酚硫酸法测定了夏枯草粗多糖和PLS3的多糖含量分别为81.62%和85.33%。三次测定结果的相对标准偏差为0.56%和0.34%。3)建立了一种柱前对氨基苯甲酸(p-AMBA)衍生反相离子对色谱法同时分离检测多糖中多种单糖及糖醛酸组成的方法,筛选出适合于p-AMBA糖衍生物分离的色谱柱,考察了柱温、流动相组成等对10种单糖和两种糖醛酸的p-AMBA衍生化产物的保留值及分离的影响,优化了反应温度和反应时间等衍生化条件。采用紫外检测器时,方法的检出限为(2.55～13.4)×10-7mol/L;采用荧光检测器时,方法的检出限为(3.38～176)×10-8 mol/L。并用建立的p-AMBA柱前衍生化高效液相色谱法测定了夏枯草粗多糖AEPS1和PLS3以及螺旋藻多糖的单糖组成,发现夏枯草粗多糖和其主成分PLS3两者所含单糖种类一致,都为半乳糖、葡萄糖、甘露糖、木糖、阿拉伯糖、鼠李糖,但两种物质的单糖组成相对摩尔百分比有所差异。螺旋藻多糖含有Fruc、Gal、Glc、Man、Xyl、Ara、Rib、GalUA、Fuc、GlcUA及Rha,其摩尔比为:27.6:21.9:371.3:2.2;12.2:5.6:3.4:4.6:4.2:1:4.8,比以往文献中同时检出的单糖和糖醛酸种类要多。以经典的气相色谱法验证结果显示:新建立的对氨基苯甲酸衍生化法不仅结果可靠,而且有更高的灵敏度,能同时分离出的单糖种类较其他方法要多。通过上述研究,建立了一种更好的测定夏枯草多糖的单糖组成的方法,并对夏枯草多糖的测定、波谱学行为进行必要的探讨,为制定夏枯草药品和保健品的质量标准奠定相应的基础,为分析检测夏枯草样品提供有力的依据,以期对我国夏枯草制品的深层开发做出有益的贡献。