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1研究目的近年来,由各种原因(如HIV感染、免疫抑制药物的使用、过度使用放化疗药物和介入性治疗等)导致的念珠菌感染率越来越高,死亡率居高不下,其中主要是白色念珠菌感染。长期以来,由于缺乏一种简单快速的分型方法对白色念珠菌进行评价,从而无法对白色念珠菌进行有效的流行病学调查。一些基于白色念珠菌表型的分型方法繁琐且缺乏敏感性和重复性,鉴别能力不高,因此寻找快速、准确的分型方法鉴定致病菌成为急需解决的问题。本课题试图了解HIV感染者和健康人群口腔白色念珠菌基因型分布情况；比较两组人群口腔白色念珠菌的基因型是否存在差异；为白色念珠菌的发病机制和流行病学研究提供理论基础和研究依据。2研究方法本研究实验组为54株分离云南大理地区HIV感染人群口腔白色念珠菌,对照组为54株分离同一地区健康人群口腔白色念珠菌。抽提两组人群口腔白色念珠菌基因组DNA,然后采用CA-INT引物PCR法扩增白色念珠菌包含1类内含子的编码rRNA的25S rRNA区(rDNA),根据扩增条带大小进行基因分型,并应用X2检验对两组人群口腔白色念珠菌基因型别进行分析。3研究结果3.1 54株HIV感染者口腔白色念珠菌,选择了CA-INT-L和CA-INT-R两条特异性引物,经PCR扩增后,所有白色念珠菌可扩增出清晰而稳定的条带,检测成功率为100%,其中最小条带约450bp,最大条带约840bp,45株具有约450bp,5株具有约840bp,4株同时具有约450bp和840bp两条带,即具有A型(仅有450bp)、B型(仅有840bp)、C型(既有450bp,又有840bp)三种基因型,以A型最为多见,而B型和C型少见。3.2在对照组54株健康人群口腔白色念珠菌中,也可扩增出清晰并且稳定的条带,其中最小条带约450bp,最大条带约840bp,36株具有约450bp,12株具有约840bp,6株同时具有450bp和840bp两条带,可归为A型(仅有450bp)、B型(仅有840bp)、C型(既有450bp,又有840bp)三种基因型,也以A型最为多见,而B型次之,C型较少见。3.3 HIV感染人群口腔白色念珠菌中A型所占构成比(83.33%)大于健康人群口腔白色念珠菌中A型所占构成比(66.67%),经X2检验,P<0.05,差别有统计学意义；而HIV感染人群口腔白色念珠菌中B型所占构成比(9.26%)小于健康人群口腔白色念珠菌B型所占构成比(22.22%),经X2检验,P>0.05,差别无统计学意义；HIV感染人群口腔白色念珠菌中C型所占构成比(7.41%)小于健康人群口腔白色念珠菌C型所占构成比(11.11%),经X2检验,P>0.05,差别无统计学意义。3.4 HIV感染人群和健康人群的口腔白色念珠菌基因型别分布经SPSS17.0X2检验结果显示：X2=4.282,P=0.118,按α=0.05水准,两组间A、B、c和c’基因型别分布差异无统计学意义。4研究结论4.1 HIV感染人群和健康人群口腔白色念珠菌基因型分布构成相同,均有A、B和C型,因此两组人群口腔白色念珠菌具有基因多态性。4.2 HIV感染者口腔白色念珠菌与健康人群口腔白色念珠菌基因型均以A型所占比例最多,而B型次之,C型较少。其中HIV感染人群口腔白色念珠菌中A型所占构成比大于健康人群口腔白色念珠菌中A型所占构成比,差别有统计学意义；B型和C型在两组人群口腔白色念珠菌中所占构成比差异均无统计学意义。4.3运用CA-INT引物PCR法是进行白色念珠菌基因分型的方法之一,此方法是较为科学合理、简便快速、结果稳定、准确可靠,因此特异性CA-INT引物PCR法是较好的白色念珠菌种内菌株间鉴定的方法,适合于临床和科学研究的运用。