microRNA(miRNA)是长度在21-23nt的非编码RNA分子.miRNA对基因表达调控是通过转录后调控抑制靶mRNA翻译或者影响其稳定性的方式进行。目前为止,已发现的,miRNA的调控功能涉及到多种生物学过程,包括：表观修饰、细胞增殖分化、凋亡、干细胞多能性维持、肿瘤发生等多个方面。实验一：虽然microRNA在模式动物中已经被广泛研究,但是在如牛等大动物的胚胎发育过程中的作用还不清楚。而且最近有越来越多的文献报道,牛早期胚胎发育调控模式与小鼠并不完全相同。我们通过低密度芯片对牛体细胞核移植(SCNT).体外受精(IVF)、孤雌激活(PA)和人工受精(AI)胚胎的microRNA表达谱进行研究。我们发现SCNT胚胎microRNA表达总量最低,其表达总量平均是其它三个对照组的75%。其中miR-92和miR-19b在AI中表达量远高于NT组。过表达miR-19b会导致囊胚率显著降低。而miR-19b表达抑制则导致囊胚率升高到正常囊胚水平。miR-19b异常表达对牛囊胚8细胞-16细胞期合子基因重新甲基化产生影响,可能造成SCNT囊胚ICM(1nner Cell Mass)多能性不完全。使用多个miRNA靶基因预测软件和实验验证,miR-19b候选靶基因RAP1A.可以与]miR-19b互相作用,是miR-19b的靶基因。RAP1A广泛参与到MAPK信号通路,参与细胞增殖分化调控和细胞胁迫保护。我们认为,SCNT中供体核重编程不完全,会导致miR-19b表达不足,通过影响miR-19b下游靶基因RAP1A,影响内细胞团多能性,最终导致克隆牛胚胎发育缺陷。正常情况下,miR-19b表达,抑制Raplα,有利于囊胚发育过程中的自检过程,保证了囊胚质量。所以,在体细胞核移植操作过程中过表达niR-19b或者构建阶段性过表达转基因供体核,可能会有助于提高SCNT胚胎的个体成活率。实验二：microRNA在胚胎器官发育过程中也起到重要作用。由于受到高原低氧分压与低气压的影响,非世居高原动物,如禽类,高原环境会严重影响胚胎孵化和幼鸡的成活率。虽然高原适应性已经被广泛研究,但是在鸡胚胎发育过程中,尤其是对胚胎成活率有很大影响的肺发育和呼吸转化过程的研究还是很有限。实验研究了低氧胁迫环境中miRNA对肺适应性发育的调控作用。平原鸡发育过程中低氧胁迫会诱导miR-15a高表达,而在藏鸡肺发育过程中miR-15a一直维持在较高的水平。我们发现这个过程主要集中在E19-20时期,是尿囊呼吸和肺呼吸转化的关键时期。研究发现,miR-15a:通过对其下游靶基因bcl-2调控,实现对肺发育的影响,有效调控鸡肺部交叉气体交换系统的构建。