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胚胎干细胞（embryonic stem cell，ESCs，简称ES细胞）是早期胚胎中分离出来的一类高度未分化细胞，它具有体外培养无限增殖、自我更新和多向分化的特性。促有丝分裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinases, MAP激酶,MAPK)链是真核生物信号传递网络中的重要途径之一，主要介导了细胞的生长、发育、分裂及分化等过程,包括p38、JNK、Mek-Erk这三条信号通路。已有研究表明，在可诱导过表达iRas稳定系中诱导Ras表达可以下调Nanog的蛋白水平，而这一下调作用可以在加入Mek特异性抑制剂（PD98059）后得到一定程度的恢复，暗示了Mek对Nanog的抑制作用。 为了探究Mek是如何调控Nanog基因表达的，我们构建了定点整合的可诱导过表达caMek1、caErk1、caErk2的稳定系，发现caMek1抑制Nanog表达，而其下游的两个经典激酶Erk1、Erk2对Nanog的抑制作用不明显。为了进一步证实这一结论，我们通过 CRISPR/Cas技术进一步构建了可诱导过表达 caMek1中 Erk1敲除的稳定系，并在此细胞系中用siRNA敲低Erk2，发现Erk水平较低情况下， caMek1仍能抑制Nanog表达。由于Erk1/2高度的氨基酸同源性和功能互补性，单独敲除一个基因不足以说明问题，只有Erk1/2同时敲除才能阐明问题，目前Erk敲除的ES细胞系还没有建立，因此我们尝试构建Erk1/2双敲的ES细胞系。在此过程中我们发现Erk1/2双敲可使ES细胞致死。最终我们构建了可诱导Erk1中Erk敲除的ES细胞系iErk1-Erk KO，撤掉Doxycycline（Dox）时模拟Erk双敲，发现在Erk水平极低的情况下ES细胞不能进行正常的EB分化和神经分化，但不影响多能性基因的下调。此时Nanog还能响应Mek抑制剂PD0325901和外源过表达的caMek1，但Mek1对Nanog的抑制效果降低，暗示了Erk部分介导了Mek1对Nanog的抑制作用，可能还存在其它的 Mek1下游蛋白。寻找这些未知蛋白以及探索其作用机制是接下来的关键工作，这也将丰富我们对于Mek-Erk信号通路如何调控ES细胞多能性和分化的认识。