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目的：神经胶质瘤是中枢系统最常见的恶性肿瘤,向周围组织的侵袭是其治疗效果差及预后不良的主要原因。已有研究表明趋化因子及其受体与肿瘤侵袭密切相关,可能是通过和炎性细胞浸润相似的机制参与了肿瘤的侵袭。本课题旨在研究CXCL12/CXCR4生物学轴在胶质瘤侵袭中的作用,并建立琼脂糖下迁移模型,为研究胶质瘤细胞侵袭提供一个方法学的支持。方法：1.培养人胶质瘤细胞U251：U251细胞培养于含10%新生牛血清、青霉素和链霉素各100μ/ml的RPMI 1640培养基中,在37℃、饱和湿度、5%CO2条件下常规培养,每3-4天换液传代培养。2.应用间接免疫荧光法,抗CXCR4抗体、TRITC标染U251细胞,检测受体CXCR4在胶质瘤细胞U251的表达。3.建立琼脂糖下细胞迁移(Under-agarose cell migration assay)模型,探讨U251细胞在不同浓度的趋化因子CXCL12作用下的侵袭能力。按因子浓度分为6个实验组,因子浓度分别为50ng/ml、100ng/ml、200ng/ml、300ng/ml、400ng/ml、500ng/ml。阴性组无菌PBS液代替趋化因子。细胞培养箱过夜后,观察细胞迁移现象。4.收集肿瘤标本24例,按病理类型进行分组,流式细胞术(flow cytometry, FCM)检测不同病理级别CXCR4的表达情况,探讨CXCR4表达与肿瘤恶性程度的关系。结果：1.U251细胞中CXCR4主要定位与胞膜和胞浆,胞膜着色较重,呈橙红色阳性染色。2.琼脂糖下趋化法(under-agarose cell migration assay),检测不同浓度趋化因子CXCL12对U251细胞迁移的影响。实验组细胞迁移距离分别为40.96±5.22μm、49.84±2.20μm、106.11±1.59μm、165.36±1.19μm、245.87±0.87μm、252.45±1.11μm。因子浓度为100～500ng/ml时与阴性组相比细胞发生明显迁移(P<0.05)；组间相比400ng/ml与500ng/ml浓度组细胞迁移距离无统计学意义(P>0.05),其余各组间相比均有差异。3.流式细胞术(flow cytometry,FCM)测定Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级别胶质瘤CXCR4表达率,分别为21.36±2.70%、26.39±4.27%、52.59±2.37%、56.23±1.24%。四个级别胶质瘤CXCR4的阳性率均有显著差异(P<0.05)。结论：1.胶质瘤细胞U251表达趋化因子受体CXCR4o2.本实验成功建立了胶质瘤细胞琼脂糖下体外侵袭模型。该模型提供了直线、平面上空间上的研究条件,并允许在同一环境内、不同影响因素下进行对胶质瘤细胞迁移、侵袭能力的研究；趋化因子CXCL12对胶质瘤有明显的趋化作用,肿瘤细胞顺因子浓度梯度定向迁移。3.趋化因子受体CXCR4表达与胶质瘤的病理级别有关,肿瘤恶性度越高CXCR4的阳性率越大。