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本研究通过乳酸脱氢酶酶(LDH)反应的可逆性,在特定的条件下,使囊泡形成聚集体或分散,实现与酶反应相关联,为可控的人工多细胞体系的构建提供借鉴。首先,采用化学合成法从十六烷基胺和十六烷基溴两种原料出发,经过取代、缩合等七步反应最终合成了两种肽脂质——阳离子型肽脂质溴化N,N-二-十六烷基-Nα-6-三甲胺基己酰-L-丙氨酰胺(N+C5Ala2C16)和陶瓷型脂质溴化N,N-二-十六烷基-Nα-[6-[(3-三已氧基硅)丙基二甲胺基]己酰基]丙氨酰胺((EtO)3SiC3N+CsAla2C16),最终收率分别为4.4%和3.5%。通过考察在10mM 4-羟乙基哌嗪乙磺酸(HEPES)pH7.0缓冲体系中丙酮酸钠和LDH对于还原型辅酶Ⅰ(NADH)与含有丙氨酸残基的肽脂质(N+C5Ala2C16)形成的阳离子囊泡聚集行为的影响,确定了实验条件为丙酮酸钠和LDH的浓度分别为1.0 mmol/L和2.24 nmol/L。考察了氧化型辅酶Ⅰ(NAD)+和还原型辅酶Ⅰ(NADH)对阳离子囊泡间聚集的影响,结果表明:在由0.50 mmol/L的脂质形成的阳离子囊泡中,带有一个净负电荷的NAD+浓度从0增加到2.40mmol/L,囊泡悬液外观没有明显的变化,囊泡不形成聚集;带有两个净负电荷的NADH浓度从0.25mmol/L增加到0.80mmol/L,囊泡悬液的浊度明显增加,囊泡产生了聚集;在乳酸脱氢酶的存在下,囊泡的聚集体随着NADH在酶反应过程中不断被转化为NAD+,被重新分散,借助电子显微镜观察到了囊泡的聚集和用酶进行分散后的状态。最后,用超滤的方法考察了NADH与囊泡的最大结合量为0.33mmol/L。考察了在不同pH Tris缓冲液体系中,乳酸脱氢酶在有乳酸的条件下转化NAD+为NADH能力。确定了反应体系为pH 9.06,NAD+ 2mmol/L,乳酸10mmol/L。当LDH 4.48nmol/L加入上述条件由陶瓷型脂质形成的囊泡(Cerasome)体系后,500nm下观测到囊泡溶液的吸光度大大升高,证明了囊泡产生了聚集,同时原子力显微镜照片印证了聚集的产生。对比实验中,发现阳离子囊泡(N+ C5Ala2C16)在此条件下不发生聚集。