【摘 要】
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目的 肺癌是最常见的恶性肿瘤之一,在我国肺癌死亡占癌症死亡病因的第一位,且发病率有逐年增加的趋势。非小细胞肺癌约占原发肺癌的80%,目前已发现很多非小细胞肺癌相关基因,
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目的 肺癌是最常见的恶性肿瘤之一,在我国肺癌死亡占癌症死亡病因的第一位,且发病率有逐年增加的趋势。非小细胞肺癌约占原发肺癌的80%,目前已发现很多非小细胞肺癌相关基因,如:ras基因家族、myc基因家族、erbB基因家族、P53、Rb等。凋亡和肿瘤的发生、发展有着密切的关系,是肿瘤耐药及产生化疗、放疗副作用的重要原因。研究发现非小细胞肺癌细胞存在多种凋亡基因异常,如BCL-2、BAX,P53等表达异常,提示肺癌细胞存在凋亡通路功能异常。人APAF-1基因位于12q23,APAF-1和Casp9是c-Myc诱导肿瘤细胞凋亡中P53的下游成分,它参与线粒体介导的凋亡途径。APAF-1基因很少发生突变,引起该基因功能缺失的机制有:APAF-1基因调控区杂合性丢失(LOH),启动子区甲基化,其中甲基化引起的基因功能“静默”是主要原因。本研究探讨APAF-1基因在非小细胞肺癌中的表达及启动子区甲基化情况,探讨该基因与非小细胞肺癌发生、发展的关系。 方法 1.免疫组化 将选取的非小细胞肺癌及癌旁正常对照组织标本用10%的福尔马林液固定,常规用石蜡包埋后切片,然后免疫组化SP法进行染色,按细胞质着色与否划分为阳性、阴性进行统计。 2.半定量RT-PCR分析APAF-1表达 用TRIZOL试剂提取总RNA。用逆转录酶和Olingo(dT)20引物合成
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