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黄芩作为黄芩汤中的有效药物,研究发现它对乳腺癌具有治疗作用,其活性成分汉黄芩素在乳腺癌中也具有抗癌作用。课题组前期工作发现汉黄芩素可有效抑Nrf2信号通路,报道指出Nrf2可能是实现放疗增敏作用的潜在靶点,这表明汉黄芩素可能具有对乳腺癌的潜在增敏作用。因此本论文拟采用乳腺癌MCF-7、MDA-MB-231细胞建立放疗抵抗模型,研究汉黄芩素对乳腺癌是否具有放疗增敏作用,同时建立了一个同时测定大鼠血浆中多西他赛和汉黄芩素浓度的HPLC-MS/MS法,并应用该方法考察汉黄芩素和多西他赛在乳腺癌大鼠体内的药动学特性。方法:一、采用每周5次,每次2Gy,总剂量为60 Gy分次照射诱导建立乳腺癌细胞放疗抵抗模型MCF-7R、MDA-MB-231R;通过克隆形成实验和多靶单击模型,验证放疗抵抗模型建立的成功与否。MTT法检测汉黄芩素对MCF-7R、MDA-MB-231R细胞增殖的抑制作用。用克隆形成实验测定汉黄芩素对MCF-7R、MDA-MB-231R细胞是否具有放疗增敏作用。二、建立同时测定大鼠血浆中多西他赛和汉黄芩素浓度的HPLC-MS/MS方法,并进行方法学评价。三、用N-甲基-N-亚硝基脲（NMU）诱导建立大鼠乳腺癌模型,给予乳腺癌大鼠汉黄芩素和多西他赛药物后,测定其血药浓度,并研究汉黄芩素和多西他赛在乳腺癌大鼠体内的药动学特征。结果:一、放射敏感性参数SF2（MCF-7）=60.64%、SF2（MCF-7R）=81.74%,二者差异显著（P<0.01）;SF2（MDA-MB-231）=26.82%、SF2（MDA-MB-231R）=42.58%,二者差异显著（P<0.01）。汉黄芩素对MCF-7R、MDA-MB-231R细胞48h的IC50值分别为104.74±2.4μM、141.40±2.8μM,浓度为25μM和50μM的汉黄芩素对MCF-7R、MDA-MB-231R细胞具有放疗增敏作用。二、建立的HPLC-MS/MS法以紫杉醇为内标,色谱柱为Hypersil Gold‐C18（2.1×150mm,5μM,Agilent,USA）,流动相:乙腈:0.1%甲酸水溶液（60:40v/v）,流速:0.3ml/min,柱温:30℃。串联质谱仪采用正离子模式。方法学验证结果显示,线性关系良好（R>0.99）,日内日间精密度在15%以内,准确度在85%-115%之间,提取回收率在72.38%-84.71%之间,基质效应在92.83%-105.23%之间,样品稳定性好。三、采用NMU75mg/kg腹腔注射,35d后成功建立大鼠乳腺癌模型。汉黄芩素的Cmax和AUC0-t在10-40mg/kg的剂量范围内成比例增加,联合给药后多西他赛的Cmax、AUC0-t和t1/2以及汉黄芩素的AUC0-t显著增加（P<0.05）。结论:采用每周5次,每次2Gy,总剂量为60Gy的分次诱导照射可成功建立乳腺癌MCF-7、MDA-MB-231细胞放疗抵抗模型;汉黄芩素对MCF-7R、MDA-MB-231R细胞有放疗增敏作用;建立的HPLC-MS/MS法同时测定大鼠血浆中的汉黄芩素和多西他赛浓度快速,准确,稳定,特异性好。汉黄芩素和多西他赛合用时在体内存在药动学相互作用,导致二者在体内的暴露量增多,因此二者合用时需要考虑存在药动学的改变,避免潜在的毒副作用。