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背景:肿瘤具有组织来源特异性,它决定肿瘤的生物学特点以及每种肿瘤的特殊性。我们前期对口腔鳞状细胞癌患者易感基因全基因组外显子关联测序分析,发现人类白细胞抗原B(human leukocyte antigen B,HLA-B)和位于19号染色体开放阅读框45的基因(chromosome 19 open reading frame45,C19orf45)可能与口腔癌的发生存在关联,是研究口腔鳞状细胞癌重要的候选基因。研究表明,肿瘤细胞可通过降低HLA-B表达,降低杀伤性T细胞(cytotox T cell)对肿瘤的抑制作用,逃避机体免疫监视的能力。目前C19orf45蛋白的相关研究尚无报道。颗粒酶B(granzyme B)作为杀伤性T细胞的效应因子,其指标常用来衡量肿瘤微环境免疫状况。目的:应用颗粒酶B作为机体抗肿瘤免疫的衡量标准,通过检测HLA-B、C19orf45在口腔鳞状细胞癌(OSCC)原发灶与转移灶以及口腔正常黏膜、癌前病变的表达情况,探讨其在机体抗肿瘤免疫以及口腔鳞癌发生发展和淋巴道转移中的作用。方法:(1)选取广西医科大学附属口腔医院2016年5月至2017年5月的来院就诊的口腔鳞状细胞癌患者70例,作为口腔鳞状细胞癌组,取其病理组织;同期在院行口腔局部组织活检术,术后病理证实为口腔黏膜白斑的癌前病变组织10例,作为癌前病变组,以及正常口腔上皮组织14例,作为正常对照组。通过颗粒酶B、HLA-B和C19orf45免疫组织化学染色,比较HLA-B、C19orf45的表达及其与颗粒酶B的表达和临床各病理参数之间的关系。(2)采用蛋白免疫印记实验,检测HLA-B、C19orf45蛋白在口腔肿瘤细胞株KB细胞和正常口腔组织细胞的表达。结果:(1)免疫组化结果显示,HLA-B在正常组织、癌前病变组织、癌组织的表达逐渐下降(P=0.008);正常组织和癌前病变组织与高分化OSCC表达无明显差异,但是明显高于中、低分化OSCC(P=0.031);不同T分期之间的比较无显著性差异(P=0.647);原发灶与转移灶HLA-B表达亦无显著性差异(P=0.642)。但是,在发生转移的原发灶HLA-B表达低于未发生转移的原发灶(P=0.069)。HLA-B与颗粒酶B的免疫组化相关分析发现,原发灶与转移灶的HLA-B与颗粒酶B表达均大致成正比,其线性相关系数分别为R~2=0.27和R~2=0.39,均为中度相关。(2)C19orf45在口腔鳞状细胞癌中的表达显著高于正常组织以及癌前病变组织(P=0.043),在口腔鳞状细胞癌中各项临床病理学指标比较均无显著性差异,在C19orf45与颗粒酶B的免疫组化相关对比中,原发灶与转移灶的C19orf45与颗粒酶B表达均无相关性。(3)蛋白免疫印记结果显示,HLA-B蛋白在正常口腔组织细胞的表达高于KB口腔癌细胞;C19orf45蛋白在正常口腔组织细胞的表达低于KB口腔癌细胞。结论:(1)口腔癌组织(尤其是中低分化)HLA-B表达较正常组织以及癌前病变、高分化鳞癌明显下调,这与观察到的中低分化鳞癌较高的淋巴道转移率可能相关。说明HLA-B的表达减弱可能通过肿瘤免疫逃逸机制在口腔鳞癌的淋巴道转移中有着重要意义,HLA-B表达可能可作为一项监测口腔癌恶性程度与淋巴道转移的指标。(2)HLA-B与颗粒酶B呈中度相关,而C19orf45与颗粒酶B无关,提示HLA-B之外,可能还有其他因素影响机体抗肿瘤的细胞免疫水平,而C19orf45与机体肿瘤免疫无关。(3)C19orf45可能与肿瘤细胞的生长有关,但还需进一步研究。