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本研究从川西牧区采集自然发酵酸乳样品28份,从中分离得到109株乳酸菌,其中杆菌59株,球菌50株,以这109株未知菌株和12株已知参照菌株为研究对象,采用数值分类方法,对菌株的表型多样性进行了研究,并根据数值分类的结果,对菌株的种属做出鉴定。 分离得到的菌株因长期生长在高海拔、寒冷、干燥、高紫外线辐射、昼夜温差较大的恶劣环境,某些菌株表现出特殊的形态和生理特征,球菌的直径和杆菌的长度比一般的乳酸菌大,有些呈长链状排列,大多数菌株能在18℃和45℃生长,适宜生长的温度范围较广,筛选出能在较低温下生长的优良菌株用作酸乳发酵剂菌种,可降低生产能耗。 乳酸球菌数值分类中供试菌株在72%的相似性水平上聚在一起。在82.8%的相似水平分为5个表观群,在此相似性水平上参照菌株完全分开,球菌大多数菌株(76%)分布于群1内,表明乳酸球菌的物种多样性程度低。乳酸杆菌数值分类中供试菌株在70%的相似性水平上聚在一起。在80%的相似水平上分为13个表观群,在此相似性水平上,参照菌株得以完全分开,分离自同一样品的乳酸杆菌菌株分布在不同的群中,表现出乳酸杆菌的多样性。从乳酸球菌和乳酸杆菌的数值聚类图可看出二者的共同点:大部分未知菌株都独立成群,只有少数未知菌株与已知参照菌株聚在一起,说明大部分未知菌株能与本研究所用的已知参比菌株在表型性状上相区别。乳酸球菌对链霉素敏感度高于杆菌,二者对青霉素敏感度相差不大。 经形态和理化特征鉴定,分离得到的乳酸杆菌归属于乳酸杆菌属,包括:短乳杆菌(L. brevis)、绿色乳杆菌(L. viridescens)、乳酸乳杆菌(L. lactis)、棒状乳杆菌(L.coryniformis)、希氏乳杆菌(L. hilgardii)、赖氏乳杆菌(L. leichmannii)、食果糖乳杆菌(L. fructivorans)、双发酵乳杆菌(L. bifermentans)、德氏乳杆菌保加利亚亚种(L.delbrueckii subsp. Bulgaricus)、干酪乳杆菌假植物亚种(L. casei subsp.pseudoplantarum)、干酪乳杆菌干酪亚种(L. casei subsp. casei)、发酵乳杆菌(L.fermentum)、嗜酸乳杆菌(L. acidophilus)和弯曲乳杆菌(L. curvatus)。 分离得到的乳酸球菌归属于4个属:乳球菌属(Lactococcus)、链球菌属(Streptococcus)、明串珠菌属(Leuconostoc)、肠球菌属(Enterococcus)。乳球菌属有:乳酸乳球菌乳酸亚种(Lac. lactis subsp. lactis)、乳酸乳球菌(Lac. lactis);链球