【摘 要】
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该次课题以上海市交通区PM为研究对象,以气管滴注作为急性染毒方法,从免疫损伤和氧化应激损伤两方面研究PM的肺毒性机制,并探讨了NF-κB在这个过程中所起到的核心调节作用,通过比较PM对敏感系小鼠CBL/6和耐受系小鼠CH/He肺损伤程度的差异和分析两系小鼠TNF-α基因序列的不同,探讨TNF-α的基因多态性和PM急性肺损伤遗传易感性的关系.以昆明种小鼠为试验对象,气管滴注PM24小时后进行肺灌洗液
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该次课题以上海市交通区PM<,2.5>为研究对象,以气管滴注作为急性染毒方法,从免疫损伤和氧化应激损伤两方面研究PM<,2.5>的肺毒性机制,并探讨了NF-κB在这个过程中所起到的核心调节作用,通过比较PM<,2.5>对敏感系小鼠C<,57>BL/6和耐受系小鼠C<,3>H/He肺损伤程度的差异和分析两系小鼠TNF-α基因序列的不同,探讨TNF-α的基因多态性和PM<,2.5>急性肺损伤遗传易感性的关系.以昆明种小鼠为试验对象,气管滴注PM<,2.5>24小时后进行肺灌洗液成分分析和病理学检查.结果显示,灌洗液中乳酸脱氢酶(LDH)、酸性磷酸酶(ACP)、碱性磷酸酶(AKP)、白蛋白(ALB)含量,各剂量组与生理盐水对照组比较存在显著性差异,并表现为剂量依赖性关系;巨噬细胞吞噬功能下降,细胞因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素1(IL-1)活性增强,并且表现出剂量—反应关系;丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)随着染毒剂量的增加而增加,超氧化物歧化酶(SOD)随染毒剂量的增加而减少;肺组织病理学检查各染毒组也表现出炎症反应和不同程度的肺损伤.上述各指标,空白对照组和生理盐水对照组比较均无统计学差异,表明生理盐水和气管滴注操作对肺部没有显著性的损伤,PM<,2.5>的吸入可在肺部引起局部的免疫反应和氧化应激反应,从而造成对小鼠肺实质细胞和膜性组织的毒作用.核转录因子κB(NF-κB)是一种具有多向性核转录调节功能的蛋白质,在炎症反应以及氧化应激过程中起重要的调节作用,在许多肺部疾病病理早期都出现了NF-κB激活现象.用PM<,2>染毒C<,57>BL/6小鼠24小时后,用RT—PCR技术对肺组织中TNF-α、IL-1、IL-6、NOS和NF-κB的基因表达水平进行检测,结果显示TNF-α、IL-1、IL-6、NOS和NF-κB基因表达均明显升高,并呈现出剂量依赖性,NF-κB的基因表达水平与各指标基因水平显著相关.遗传背景是影响颗粒物对机体损伤的一种重要因素.用PM<,2.5>染毒C<,57>BL/6小鼠和C<,3>H/He小鼠后进行比较,结果显示,相同的染毒剂量组C<,57>BL/6小鼠的肺灌洗液中LDH、ACP、ALB和TNF-α活性以及肺组织中TNF-α基因表达都明显高于C<,3>H/He小鼠,同一品系小鼠的各指标均表现出剂量依赖性.表明C<,57>BL/6小鼠对PM<,2.5>更敏感,PM<,2.5>对肺造成的炎症损伤具有遗传易感性.分析比较两系小鼠TNF-α基因序列,发现TNF-α的多个等位基因上存在差异,提示TNF-α基因多态性可能与PM<,2.5>肺急性损伤的遗传 易感性有关.TNF-α是肺损伤过程中重要的炎症介质之一,又可通过NF-κB途径调节肺损伤过程,其基因多态性成为颗粒物对肺损伤易感性的重要因素之一.
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