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目的:研究清肺培元颗粒对免疫低下肺部感染小鼠血清中Treg细胞水平变化的影响,进而探讨该药物对T淋巴细胞的影响机制,为清肺培元颗粒的临床应用提供动物学研究的理论支持。方法:1.动物分组:昆明小鼠72只,雌雄各半,随机分为6组,分别为正常组、环磷酰胺组、环磷酰胺+肺炎克雷伯杆菌组(模型组)、盐酸左氧氟沙星胶囊+香菇菌多糖片(西药组)、清肺培元颗粒组(中药组)、清肺培元颗粒+盐酸左氧氟沙星胶囊(中药加西药组),每组12只,雌雄各半。2.造模及给药:适应性饲养4d后,连续3天腹腔注射环磷酰胺针剂(正常组除外),2d后,给予水合氯醛麻醉,将肺炎克雷伯杆菌菌液以滴鼻的方式接种于小鼠(正常组、环磷酰胺组除外)。3d后开始灌胃给药。3.指标检测:各组小鼠给药结束后,麻醉状态下采用眼球静脉取血法,取血至提前配备好的EDTA抗凝管中,采用流式细胞术测定小鼠外周血中CD4+T细胞、CD8+T细胞和Treg细胞含量,并计算CD4+/CD8+比值;在超净工作台取出小鼠胸腺、肺脏、脾脏,并称重和计算脾脏、胸腺指数;肺组织HE染色后在显微镜下观察病理变化。结果:1.免疫低下合并肺炎克雷伯杆菌肺部感染小鼠模型建立成功,环磷酰胺对小鼠免疫系统具有抑制作用。2.清肺培元颗粒对小鼠一般情况(体重、毛发、精神、饮食量、活动度)有一定的改善作用。与正常组相比,环磷酰胺组、模型组小鼠体重均低于正常组,差异显著(P<0.01);与模型组相比,中药组、西药组、中药加西药组小鼠体重均高于模型组,差异显著(P<0.01);与环磷酰胺组相比,中药组、西药组、中药加西药组小鼠体重均高于环磷酰胺组,差异显著(P<0.01)。3.清肺培元颗粒对实验小鼠免疫器官的影响:(1)清肺培元颗粒对实验小鼠胸腺质量的影响:与正常组相比,环磷酰胺组、模型组小鼠胸腺质量均低于正常组,差异显著(P<0.01);与模型组相比,中药组、西药组、中药加西药组小鼠胸腺质量均高于模型组,差异显著(P<0.01);与环磷酰胺组相比,中药组、西药组、中药加西药组差异显著(P<0.01);(2)清肺培元颗粒对实验小鼠胸腺指数的影响:与正常组相比,环磷酰胺组及模型组小鼠胸腺指数均明显低于正常组,差异显著(P<0.01);与模型组相比,中药组、西药组、中药加西药组小鼠胸腺指数均高于模型组,差异显著(P<0.01);与环磷酰胺组相比,西药组、中药加西药组差异显著(P<0.01),中药组差异有统计学意义(P<0.05);(3)清肺培元颗粒对实验小鼠脾脏质量的影响:与正常组相比,环磷酰胺组、模型组小鼠均低于正常组,差异显著(P<0.01);与模型组相比,中药组、西药组、中药加西药组小鼠均高于模型组,差异显著(P<0.01);与环磷酰胺组相比,中药组、西药组、中药加西药组小鼠均高于环磷酰胺组,差异显著(P<0.01);(4)清肺培元颗粒对实验小鼠脾脏指数的影响:与正常组相比,环磷酰胺组、模型组小鼠均低于正常组,差异显著(P<0.01);与模型组相比,西药组、中药加西药组小鼠均高于模型组,差异显著(P<0.01),中药组有统计学意义(P<0.05);与环磷酰胺组相比,西药组、中药加西药组小鼠均高于模型组,差异显著(P<0.01),中药组有统计学意义(P<0.05)。4.清肺培元颗粒对实验小鼠外周血T淋巴细胞亚群的影响:(1)清肺培元颗粒对实验小鼠外周血CD4+T细胞百分比的影响:与正常组相比,环磷酰胺组、模型组差异显著(P<0.01);与模型组相比,中药组、西药组、中药加西药组均无统计学意义(P>0.05);与环磷酰胺组对比,中药组、西药组、中药加西药组均无统计学意义(P>0.05);(2)清肺培元颗粒对实验小鼠外周血CD8+T细胞百分比的影响:与正常组相比,环磷酰胺组及模型组均明显低于正常组,差异显著(P<0.01);与模型组相比,西药组、中药加西药组均差异显著(P<0.01),中药组差异有统计学意义(P<0.05);与环磷酰胺组相比,西药组、中药加西药组均差异显著(P<0.01),中药组差异有统计学意义(P<0.05);(3)清肺培元颗粒对实验小鼠外周血CD8+T/CD4+T细胞比值的影响:与正常组相比,环磷酰胺组、模型组小鼠均高于正常组,差异显著(P<0.01);与模型组相比,中药组、西药组、中药加西药组小鼠均差异显著(P<0.01);与环磷酰胺组相比,中药组、西药组、中药加西药组小鼠均差异显著(P<0.01)。5.清肺培元颗粒对小鼠外周血Treg细胞的影响:与正常组相比,环磷酰胺组、模型组小鼠均低于正常组,差异显著(P<0.01);与模型组相比,中药组、西药组小鼠均高于模型组,差异有统计学意义(P<0.05),中药加西药组差异显著(P<0.01);与环磷酰胺组相比,中药组、西药组、中药加西药组小鼠均高于环磷酰胺组,差异有统计学意义(P<0.05)。6.清肺培元颗粒对实验小鼠肺脏病理变化的影响:与模型组相比,中药组、西药组、中药加西药组对肺部严重程度具有一定的改善,以中药加西药组改变最为明显。结论:1.环磷酰胺大剂量(100mg/kg)应用时能够使小鼠免疫系统紊乱,造成免疫功能低下,易感染肺炎克雷伯杆菌,表明该模型重复性良好,有利于相关动物实验研究的开展。2.清肺培元颗粒可以有效增加免疫低下肺部感染模型小鼠的胸腺质量及胸腺指数、脾脏质量及脾脏指数,说明清肺培元颗粒对免疫低下肺部感染小鼠模型的免疫功能具有一定的调节作用。3.清肺培元颗粒可以有效改善免疫低下肺部感染小鼠模型外周血中T淋巴细胞亚群的水平,对机体紊乱的免疫功能有正向调节作用。4.清肺培元颗粒可以有效改善免疫低下肺部感染小鼠模型外周血中Treg细胞水平,有助于免疫失衡的恢复,达到增强机体细胞免疫功能。