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【目的】本实验应用密度梯度离心法联合流式细胞技术检测外周血中结直肠癌循环肿瘤细胞,分析其与浸润深度、淋巴结转移、TNM分期、肿瘤分化程度等关系,探讨运用流式细胞仪检测结直肠癌患者外周血循环肿瘤细胞(circulating tumor cell,CTC)的临床价值。【方法】1采集2014年5月1日至2015年1月31日莆田学院附属医院胃肠外科60例结直肠癌患者外周血10ml,采集2014年6月1日至2014年11月31日共15例健康志愿者外周血10ml作为对照组。2外周血淋巴细胞分离法制备外周血单个核细胞悬液,平分为试验管和对照管,试验管分别标记CK19、EP-CAM、CD45单克隆抗体。阴性对照管分别加入同型对照抗体。3标记好的外周血单个核细胞通过流式细胞仪,检测CK19+/EP-CAM+/CD45-的细胞,作为结直肠癌患者CTC的标志。4所得结果用SPSS 13.0统计软件包处理,实验结果应用χ2检验统计分析,以P<0.05为差异有统计学意义。【结果】1 60例结直肠癌患者中26例检测出CTC,CTC的阳性率为43.33%,15例健康志愿者中未检测出CTC,两组阳性率差异具有统计学意义(P<0.05)。2 60例结直肠癌患者根据临床TNM分期(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ期)不同,CTC阳性率分别为10.00%、35.71%、52.94%和100.00%,四组阳性率差异有统计学意义(P<0.05);根据淋巴结转移状况(N0、N1、N2期)不同,CTC阳性率分别为25.00%、50.00%、75.00%,三组阳性率差异有统计学意义(P<0.05);根据临床肿瘤浸润深度(T1、T2、T3、T4期)不同,患者CTC阳性率分别为12.50%、26.67%、45.83%、76.92%,四组阳性率差异具有统计学意义(P<0.05)。根据肿瘤分化程度(高分化、中分化、低分化)不同,患者CTC阳性率分别为22.22%、41.67%、66.67%,三组阳性率差异具有统计学意义(P<0.05)【结论】1运用流式细胞技术,可以检测到结直肠癌患者外周血CTC。2结直肠癌患者临床分期越晚、肿瘤浸润越深、淋巴结转移越多、肿瘤分化越差,其CTC的检出率越高,且差异具有统计学意义。