【摘 要】
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目的建立大鼠单侧输尿管梗阻(UUO)及人近端肾小管上皮细胞(HK-2)纤维化模型,1.检测不同梗阻时间UUO大鼠肾P-catenin表达情况,明确P-catenin在肾脏表达的最佳时间点；2.用不同浓
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目的建立大鼠单侧输尿管梗阻(UUO)及人近端肾小管上皮细胞(HK-2)纤维化模型,1.检测不同梗阻时间UUO大鼠肾P-catenin表达情况,明确P-catenin在肾脏表达的最佳时间点；2.用不同浓度NCTD干预UUO大鼠和TGF-β1刺激的HK-2细胞,探讨NCTD对β-catenin、wnt4表达的作用；方法1.动物实验：分两批：第一批16只大鼠,分空白组、UU03天组、UU07天组、UU014天组；第二批16只大鼠,分空白组、UU014天组、NCTD (0.05mg/kg)干预组、NCTD0.1mg/kg干预组2.细胞实验：分对照组、TGF-β15ng/ml刺激组、TGF-β15ng/ml刺激+NCTD2.5mg/L干预组、TGF-β15ng/ml刺激+NCTD5mg/L干预组3.免疫组织化、Western blot检测β-catenin、Wnt4蛋白表达情况；4. RT-PCR检测β-catenin、Wnt4mRNA表达情况；结果1.随着UUO大鼠梗阻时间延长,β-catenin蛋白表达逐渐升高,UUO14天表达最强2.与UUO大鼠组相比,NCTD组β-catenin、wnt4蛋白及mRNA表达下降,差异有统计学意义3.TGF-β1刺激的HK-2细胞组较空白组P-catenin、wnt4蛋白表达上调；与TGF-β1组相比,NCTD不同浓度干预组β-catenin、wnt4蛋白表达下调,且呈浓度依赖,差异有统计学意义。结论1.UUO大鼠肾组织及TGF-β1刺激HK-2细胞中wnt4和P-catenin表达增高2. NCTD干预可以下调梗阻肾肾组织及TGF-β1刺激HK-2细胞中wnt4和β-catenin的表达
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