禽流感病毒（Avian influenza virus,AIV）能够感染家禽且在家禽中传播,且能够在家禽的呼吸道以及多种组织中复制。水禽可以携带禽流感病毒并且将其传播给其他禽类,但自身通常不表现任何临床症状,也罕有发生死亡。病毒可以由水禽传播给陆禽（尤其是鸡）并导致陆禽表现出较高的发病率和死亡率。禽流感病毒对宿主的致病性是由病毒自身的复制能力和宿主的免疫反应决定的。目前,禽流感病毒逃逸宿主天然免疫的研究主要集中在哺乳动物方面,而在水禽方面的相关研究却很少。本文拟研究禽流感病毒调控鸭TRAF3（TNF receptor associated factor3,TRAF3,肿瘤坏死因子受体相关因子3）介导抗病毒天然免疫的分子机制。为了鉴定鸭TRAF3（DKTRAF3）基因并预测其蛋白结构域,本文采用PCR技术从感染禽流感病毒的DEF细胞中扩增了鸭TRAF3基因。序列分析结果显示,鸭TRAF3基因的CDS全长为1704 bp,编码567个氨基酸,推导的蛋白分子量是64.80 k Da,等电点7.80。氨基酸序列分析表明,鸭TRAF3与鸡TRAF3的同源性为96.5%,与人TRAF3的同源性约为80.5%。结构域的预测结果表明,鸭TRAF3由四部分组成,包括RING结构域（52-87aa）、ZN fingers结构域（120-199aa）、TRAF-N结构域（Coiled-coil）（267-337aa）和TRAF-C（MATH）结构域（419-542aa）。鸭TRAF3的主要结构域与人等哺乳动物的TRAF3类似。为了研究鸭TRAF3的功能,本研究将鸭TRAF3基因转染到DEF或DF1细胞中。荧光素酶报告基因检测结果表明,鸭TRAF3基因能够激活禽IFN-β的启动子。荧光定量PCR结果发现,鸭TRAF3基因能够激活IFN-I的信号通路。CO-IP结果发现,鸭MAVS蛋白与鸭TARF3蛋白的349-567aa区域直接互作（包括MATH功能区）,但是其与鸭TRAF3蛋白的1-348aa区域无直接相互作用。这说明鸭TRAF3蛋白通过其MATH功能区直接与鸭MAVS蛋白相互作用。为了研究禽流感病毒NS1蛋白调控鸭TRAF3介导抗病毒天然免疫的分子机制,首先将鸭TRAF3质粒与H5N1亚型禽流感病毒NS1质粒共转染到DEF或DF1细胞中。荧光素酶报告基因检测结果分析表明,H5N1亚型禽流感病毒NS1蛋白可以明显地抑制鸭TRAF3基因对禽IFN-β启动子的激活。荧光定量PCR结果发现,H5N1亚型禽流感病毒NS1蛋白可以明显地抑制鸭TRAF3基因激活IFN-I的信号通路。CO-IP结果发现,H5N1亚型禽流感病毒NS1蛋白可以与鸭TRAF3蛋白的349-567aa区域直接相互作用（包括MATH功能区）,但是其与鸭TRAF3蛋白的1-348aa区域无直接相互作用。CO-IP结果发现,H5N1亚型禽流感病毒NS1蛋白可以与鸭TRAF3蛋白直接相互作用,从而影响鸭MAVS蛋白和鸭TRAF3蛋白的互作,最终影响TRAF3介导的抗病毒天然免疫信号通路。综上所述,本研究发现鸭TRAF3通过其MATH功能区直接与鸭MAVS相互作用;H5N1亚型禽流感病毒NS1蛋白通过与鸭TRAF3的MATH功能区相互作用,进而抑制IFN-β的表达;H5N1亚型禽流感病毒NS1蛋白通过与鸭TRAF3蛋白直接相互作用,从而影响鸭MAVS蛋白和鸭TRAF3蛋白复合体的形成。因此,H5N1亚型禽流感病毒NS1蛋白通过与鸭TRAF3蛋白相互作用,进而调控鸭TRAF3介导的抗病毒天然免疫反应。