香烟导致A549细胞遗传物质损伤的实验研究

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目的香烟燃烧产物中含有多种致突变物和致癌物,可以对人体产生严重的遗传损伤,本实验通过提取香烟燃烧产物制作香烟烟雾提取物,并用它刺激肺泡上皮细胞,观察香烟对肺泡上皮细胞的DNA损伤,初步探讨香烟导致肺泡上皮细胞遗传损伤。方法培养人肺泡上皮细胞A549,以二甲基亚砜(DMSO)作为溶剂制取香烟烟气提取物(cigarette smoke extract,CSE),将不同浓度的CSE作用于A549细胞,用MTT法测定细胞活性,检测DNA-蛋白质交联率(DNA-protein crosslinks,DPC)及彗星实验观察DNA损伤,同时检测超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、丙二醛(MDA)观察CSE对肺泡细胞的氧化损伤作用。结果1.10%、20%、50%CSE作用组与对照组相比细胞活性无明显差异,(P﹥0.05)活性无明显影响,而100%CSE组的细胞活性则明显下降且差异有统计学意义(P﹤0.05);2.CSE各浓度组与空白对照组及溶剂组相比,尾部DNA含量,尾长,尾距,Olive尾距均明显增高,差异有统计学意义(P﹤0.05),20%CSE及以上浓度组均表现DPC增高,两指标均有剂量效应关系。3.20%CSE及以上剂量组的SOD、GSH-PX与对照组相比明显下降, MDA则上升,(P﹤0.05),有一定的剂量效应关系。4.DPC与抗氧化指标之间存在相关性(P﹤0.05)。结论1.CSE可导致A549细胞内氧化损伤增加。2. CSE可导致A549细胞DNA损伤。3. CSE可导致A549细胞内氧化损伤指标和其导致的DPC率存在相关性。
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