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异常血供是肝细胞肝癌得以增殖、浸润及转移的最基本条件之一。在异常血管形成过程中，VEGF的异常表达可能具有重要病理意义。自1989年发现VEGF以来，有关它与肝癌病理变化间的关系已广泛受到关注。VEGF主要作用与血管内皮细胞，而VEGFR主要存在于血管内皮细胞，但VEGF及其受体在肿瘤组织中的表达部位及作用方式并不十分清楚。在本实验中，采用血管造影、组织病理学及免疫组化染色，观察原位种植肝癌的病理学改变与VEGF及其受体表达的关系，探讨VEGF及其受体与肝癌发生、发展之间的关系。材料与方法：裸鼠25只，鼠龄8周，体重18-22克，25只鼠分作5组，每组5只。实验组分别为正常对照组、术后1周组，2周组、3周组和4周组。10g·L-1戊巴比妥50mg·kg-1腹腔注射麻醉后，逐层分离暴露肝右叶，注入浓缩瘤细胞0.08-0.1ml，平均细胞数5×106个，逐层缝合备用。分别于1周、2周、3周、4周行动脉造影及用免疫组化的方法检 第。罕由人甘硕十甘佑讼式测 VEGF及 VEGFR的表达。自鼠尾静脉手推注入 760 g·L＊泛影葡胺 0．sml，Is注完，注射的同时开始拍片。血管造影后，立刻剪开裸鼠胸腔，暴露心脏，用 6号针头穿刺由左室进入主动脉，生理盐水30ml冲洗，40 g·L“‘多聚甲醛50ml灌注固定后，取出肝脏置于40 g·L”’多聚甲醛中保存。将所需标本取出，放入 209·L“’蔗糖液中浸泡 24h，直至组织完全沉淀，冰冻切片机将标本切片，厚度为20urn，室温干燥后用0刀Imol·L’kPBS冲洗，置于含有 3 g·L＊TritonX100的 0．01mol·Ll kPBS 30min，再用 0＊lmol·LJ kPBS冲洗。组织切片HE染色。另取一套片子加入W一VEGF抗体或帅－VEGFR抗体，孵育 24h后，依步骤加入二抗及显色剂。结果：各组成瘤率均为 100％，1周组肉眼难以分辨病灶，镜下可见聚集成团的瘤细胞；2周组5例中3例肉眼可看到小的瘤结节影，直径大小约0．smmS刀mm，数目2J个；3周组5例肉眼都可看到白色的瘤结节影，直径大小约lmm－10mm，4周组中瘤结节更大，其中直径最大一例达 16mm，分布更广泛和密集，相互间有融合，其中有2例肝脏明显变形变硬，此组裸鼠消瘦明显。光镜下，1周组可见瘤细胞散在肝血窦周围，2周组瘤细胞聚集成团，3周组瘤细胞团形态不规则，边界不清，向瘤周浸润，4周组瘤组织进一步进展，肝脏结构破坏，瘤细胞团内可见坏死。术后1周组VEGF表达成弱阳性，术后2周组VEGF表达成阳性，术后3周组及术后4周组VEGF表达强阳性；正常对照组VEGFR表达阳性，术后1周组肿瘤细胞与周围肝细胞VEGFR表达未见明显差异， 4 第。军医大磅硕士登佑伦式术后2周、3周、4周肿瘤新生血管VEGFR表达逐渐增强，新生血管内皮细胞的VEGFR着色明显强于瘤周肝组织内较大的血管内皮细胞。肿瘤细胞亦可见VEGFR染色。血管造影显示术后2周组肝脏血管开始有增生及扭曲，3周及4周组血管改变更加明显。结论：血管造影的结果与肿瘤进展的程度成正相关，血管造影显示为多血供的肝癌结节VEGF表达较强。癌结节早期主要依赖于肝血窦血供，生长方式以局限性膨胀生长为主。伴随VEGF及其受体表达的增强，癌灶生长速度明显加快，且有向周围正常肝组织侵袭生长之趋势。VEGF首先来源于旁分泌，在后期肿瘤自分泌呈VEGF高表达的重要来源。这可能是一次阻断血供，癌灶能存活。复发和转移的重要原因之一。