【摘 要】
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海水鱼是网箱和循环水养殖的重要对象。然而,管理不善的集约化水产养殖模式导致水产病害暴发流行。化学药物和抗生素的大量使用,造成环境污染、动物药物残留和抗药性增加。聚羟基丁酸酯（poly-β-hydroxybuytrate,PHB）是具有一定粒度的脂溶性颗粒物质,原核生物在C过剩、N和P等元素缺乏时可大量积累PHB。研究表明,PHB能增强水产动物对致病菌的抵抗力和生长,是一种具有应用潜力的水产养殖生物
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海水鱼是网箱和循环水养殖的重要对象。然而,管理不善的集约化水产养殖模式导致水产病害暴发流行。化学药物和抗生素的大量使用,造成环境污染、动物药物残留和抗药性增加。聚羟基丁酸酯（poly-β-hydroxybuytrate,PHB）是具有一定粒度的脂溶性颗粒物质,原核生物在C过剩、N和P等元素缺乏时可大量积累PHB。研究表明,PHB能增强水产动物对致病菌的抵抗力和生长,是一种具有应用潜力的水产养殖生物控制剂。本文利用从盐田卤水中分离出的高效积累PHB的盐单胞菌Halomonas,通过摇瓶、四联平行发酵罐（1L×4）和5-L发酵罐进行培养,通过控制发酵过程中的温度、pH、DO、发酵周期和补充碳源来优化发酵工艺,提高PHB产量。综合多参数实验结果,得出Halomonas最优发酵和积累PHB条件为:盐度30 g/L,葡萄糖浓度30 g/L,pH 7.5和DO 10%的条件下,在发酵培养42-48 h过程中,采取分段补料（0-24 h发酵初期共补充葡萄糖30 g/L、NH4Cl 2g/L和KH2PO4 0.5 g/L,24 h后仅补充葡萄糖30 g/L）,PHB积累量最大可达65%CDW,菌体干重可达27 g/L。采用上述条件,在50-L和500-L发酵罐中进行条件优化,发酵培养44 h,PHB积累量达到65%CDW,菌体干重达到23.05 g/L。将该发酵条件应用于5000-L发酵罐,发酵培养44 h,PHB积累量达到最大值78%CDW,菌体干重达到最大值31.75 g/L。实验将Halomonas菌体PHB应用于高经济价值海水鱼半滑舌鳎养殖中。将菌体PHB离心浓缩后以1%和3%PHB含量添加于配合饲料中,投喂半滑舌鳎（Cynoglossussemilaevis）幼鱼,单位养殖水体为20 m3,养殖周期为3个月。结果表明,菌体PHB添加显著提高幼鱼存活率,尤其以3%PHB添加水平最佳。本论文为大规模发酵培养Halomonas生产菌体PHB提供了工艺数据,使菌体PHB作为新型生物控制剂应用于集约化海水鱼养殖成为可能,有利于实现水产养殖业的可持续健康发展。
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