【摘 要】
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目的:探索雌激素受体ERα46在甲状腺乳头状癌中的作用及分子机制。方法:Western blot检测ERα46/ERα66在甲状腺乳头状癌BCPAP细胞及正常甲状腺细胞Nthy-ori3-1中的表达。构
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目的:探索雌激素受体ERα46在甲状腺乳头状癌中的作用及分子机制。方法:Western blot检测ERα46/ERα66在甲状腺乳头状癌BCPAP细胞及正常甲状腺细胞Nthy-ori3-1中的表达。构建ERα46真核表达载体转染至BCPAP细胞,Western blot检测ERα46/ERα66表达。提取转染细胞总RNA,反转录并用实时定量PCR(RT-PCR)检测细胞中c-fos和cyclin D1 mRNA的表达情况。流式细胞技术检测ERα46过表达的细胞周期分布及细胞凋亡。细胞计数法检测ERα46过表达后BCPAP细胞的增殖情况。RT-PCR检测miRNA21、PDCD4和PTEN的表达,Western blot检测PDCD4和PTEN蛋白的表达。结果:ERα46/ERα66比率在甲状腺乳头状癌BCPAP细胞中较甲状腺正常细胞下调(P﹤0.05)。ERα46过表达后ERα46/ERα66比率在BCPAP细胞中上调,抑制雌激素诱导的BCPAP细胞中c-fos和cyclin D1的mRNA表达(P﹤0.05),抑制了雌激素诱导的BCPAP细胞周期移行(P﹤0.05),抑制雌激素诱导的BCPAP细胞增殖(P﹤0.05)。ERα46过表达促进雌激素诱导的甲状腺乳头状癌细胞凋亡。ERα46过表达细胞中miRNA21的表达明显降低(P﹤0.05)且雌激素诱导了miRNA21表达水平的进一步降低(P﹤0.05)。ERα46过表达细胞中PDCD4和PTEN的mRNA和蛋白表达水平明显升高(P﹤0.05)且雌激素进一步诱导PDCD4和PTEN的表达水平升高(P﹤0.05)。结论:ERα46过表达上调ERα46/ERα66比率抑制甲状腺乳头状癌细胞增殖,促进细胞凋亡。
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