斑马鱼是新型的脊椎模式生物，因其众多的生物学优势，以及与哺乳动物相似的基因组学、细胞学以及生理学特征，被广泛应用于脊椎动物发育生物学以及毒理学等多个领域的研究中。本研究利用基因突变和转基因等分子生物学技术构建斑马鱼模型以进行抗氧化基因谷胱甘肽还原酶 gsr与谷胱甘肽巯基转移酶gstm的功能及表达模式的研究。gsr与gstm基因是与谷胱甘肽代谢密切相关的酶，GSH是机体细胞内含量最丰富的非蛋白类小分子，并且是抵御氧化压力损伤的第一道防线。GSR在NADPH的辅助下催化氧化型GSSG还原成GSH，继续发挥其抗氧化功能。GSTM是GST超家族中的一员，以GSH为底物，将外源氧化物催化为对机体危害小的产物，从而起到解毒作用。　　本研究使用CRISPR/Cas9系统构建斑马鱼gsr与gstm基因突变模型，该系统是现代基因工程中强有力的基因改造的工具，具有高效性和灵活性。体外构建的用于突变的含有突变靶点序列的gRNA与Cas9核酸内切酶的 mRNA一起，通过显微注射技术注入到斑马鱼单细胞受精卵中，从而获得靶点序列突变的斑马鱼突变模型。Gateway重组技术和 Tol2转座技术联合应用，快速并且高效的构建出斑马鱼 gsr与 gstm转基因模型。用于转基因的含有目的基因启动子的gateway重组质粒与Tol2转座酶的mRNA一起，通过显微注射技术注入到斑马鱼单细胞受精卵中，从而获得能特异表达EGFP报告基因的斑马鱼转基因模型。为进一步确定这两个基因的表达模式，我们制作了目的基因的RNA探针，完成了斑马鱼胚胎不同发育时期的整体原位杂交实验。　　本研究成功构建的转基因斑马鱼模型的绿色荧光蛋白特异性表达结果与斑马鱼胚胎不同发育阶段的整体原位杂交实验结果共同确定了gsr基因与gstm基因的表达模式。同时，gsr/gstm转基因模型完成了氧化还原压力的测试，gsr基因与gstm基因的表达会随着外界氧化环境的变化而变化，当外界氧化压力增大时，抗氧化基因gsr与gstm增强表达，以抵御外界氧化压力对机体造成的损伤。因此，本研究为抗氧化药物的筛选工作提供了可用的转基因斑马鱼模型。