自体SVF联合应用自体PRP对兔冈上肌腱细胞生长影响的研究

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目的:研究自体脂肪来源血管基质成分(SVF)联合应用自体富含血小板血浆(PRP)对兔冈上肌腱细胞生长的影响。方法:无菌条件下取兔冈上肌肌腱,取原代腱细胞后将其传代培养至第四代。取兔腹股沟脂肪组织制成自体SVF,取兔耳中央动脉血制成自体PRP。将第四代腱细胞分为4个组,干预措施分别为PBS缓冲液(空白对照组)、自体PRP、自体SVF、自体SVF+自体PRP。通过CCK计数法测算各组细胞的增值情况,通过细胞划痕试验检测各组细胞的迁移能力,通过Western Blot测定各组细胞分泌MMP-2的情况。结果:1.CCK-8结果显示自体SVF组、自体PRP组及自体SVF+自体PRP组的细胞增殖率在24h、48h、72h明显高于PBS缓冲液组,且自体SVF+自体PRP组增殖率高于自体SVF组及自体PRP组。2.细胞划痕试验结果显示在8h各组细胞均未见明显迁移,22h时可见自体PRP+自体SVF有较为明显的迁移现象,此时自体PRP组、自体SVF组有少许迁移现象,A组无迁移现象。当30h时,B组、C组、D组均有较为明显的迁移现象,A组仍未见明显的迁移。当46h时4组中细胞划痕均被充满。3.Western Blot结果显示MMP-2在自体SVF+自体PRP组表达最为明显,MMP-2在自体SVF+自体PRP组、自体SVF组、自体PRP组这三组中表达均高于PBS缓冲液组,且差异明显,具有统计学意义(P<0.05)。结论:1.自体SVF可以促进兔冈上肌腱细胞个体数目的增殖、腱细胞的迁移能力以及促进腱细胞分泌细胞外基质的能力;2.自体SVF与自体PRP联用促进兔冈上肌腱细胞个体数目的增殖、腱细胞的迁移能力、腱细胞分泌细胞外基质的效果更强。
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