【摘 要】
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该文在与精子细胞变态相关的理论及应用方面进行了研究,探索生育调控的新思路和新途径.为研究精子细胞变态期基因的表达调控,研究人员建立了富集精子细胞变态相关cDNA减除杂
【出 处】
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中国协和医科大学 北京协和医学院 中国医学科学院 清华大学医学部
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该文在与精子细胞变态相关的理论及应用方面进行了研究,探索生育调控的新思路和新途径.为研究精子细胞变态期基因的表达调控,研究人员建立了富集精子细胞变态相关cDNA减除杂交文库,由于性成熟大鼠睾丸中含有精原细胞,精母细胞,圆形精子细胞及长形精子细胞,而7-8天大鼠睾丸中仅有精原细胞和精母细胞,这组细胞组分差异的睾丸可作为研究哺乳动物精子变态过程中细胞分化的理想模型.分别提取两个不同性发育阶段睾丸的总RNA,纯化mRNA,逆转录为cDNA,以7-8天大鼠睾丸cDNA为驱除组(driver),性成熟大鼠睾丸cDNA为目的组(target),经四轮减除杂交,得到减除cDNA(sub-cDNA),将此cDNA克隆入λgtll载体,得到减除杂交文库.在文库构建过程中,结合PCR技术,拉增驱除组,目的组及sub-cDNA,使实验过程变得有效和简便.减除文库的建立为筛选精子细胞变态特异基因,研究其表达调控打下了基础.
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