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目的:缺血性脑卒中是全球范围内引起致残和死亡的重要原因。近来众多学者通过高通量测序技术研究发现长链非编码RNA(Long non-coding RNA,LncRNA)在缺血性脑卒中病理生理过程中发挥着无可替代的作用。SNHG17(Small nucleolar RNA host gene 17,SNHG17)参与结直肠癌相关血管新生,其能否参与缺血性脑卒中后血管新生有待进一步证实。本研究分别检测缺血性脑卒中患者血清及小鼠脑微血管内皮细胞(mouse brain microvascular endothelial cells,bEnd.3)氧糖剥夺/复氧(Oxygen-Glucose Deprivation/Re-Oxygenation,OGD/R)损伤模型中LncRNA SNHG17的表达水平,为缺血性脑卒中的诊断和治疗提供实验基础及理论依据。方法:1.选取2018年10月至2020年6月在青岛大学附属医院就诊的单侧大脑中动脉闭塞导致缺血性脑卒中患者79例。所有入选患者均接受数字减影血管造影(Digital subtraction angiography,DSA)检测以评估其侧支代偿情况,并将患者分为侧支循环良好组和侧支循环不良组。将患者空腹静脉血离心后收集血清,实时荧光定量PCR(quantitative real-time polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测患者血清中LncRNA SNHG17的表达水平。2.检测bEnd.3细胞OGD/R损伤模型中LncRNA SNHG17、血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)及碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)的表达水平:(1)构建bEnd.3细胞OGD/R损伤模型,使用倒置显微镜观察对照组和各OGD/R组的bEnd.3细胞形态、数目及结构变化,应用台盼蓝染色法、CCK-8法以及乳酸脱氢酶(Lactate dehydrogenase,LDH)释放检测试剂盒分别测定bEnd.3细胞存活比例、细胞活力以及各组培养液中LDH含量,筛选出合适的氧葡萄糖剥夺时间。(2)应用RT-qPCR检测缺氧6h、12h、18h、24h、30h时bEnd.3细胞LncRNA SNHG17的表达水平。(3)构建靶向LncRNA SNHG17的三条小干扰RNA(small interfering RNAs,siRNAs),siRNAs分别转染至bEnd.3细胞内,应用RT-qPCR筛选出干扰效率最高的siRNA序列。(4)经siRNA敲减后,通过RT-qPCR检测LncRNA SNHG17和血管新生相关基因VEGF和bFGF mRNA表达变化。结果:1.在79例缺血性脑卒中患者中,侧支循环良好组共有39例,侧支循环不良组共有40例。一般临床资料对比结果表明,两组患者在年龄、性别、高血压、糖尿病、冠心病、吸烟史、饮酒史及检验指标等方面差异均无统计学意义(P>0.05)。RT-qPCR结果发现,LncRNA SNHG17在侧支循环良好组表达明显高于侧支循环不良组(表达丰度分别为2.69±0.79,1.01±0.02),差异有统计学意义(P<0.001)。2.(1)各OGD/R组的bEnd.3细胞形态与结构损伤程度较对照组明显严重,随着缺氧缺糖时间延长,其损伤逐步加重,细胞密度也显著降低;台盼蓝染色法及CCK-8法实验结果显示,各OGD/R组的细胞存活比例与细胞活性较对照组均显著下降(P<0.05),缺氧缺糖24h时bEnd.3细胞存活占比仅为55.93%;LDH释放量检测结果显示,各OGD/R组培养液中LDH释放量较对照组均明显升高(P<0.05)。(2)各OGD/R组中,bEnd.3细胞LncRNA SNHG17的表达随缺氧缺糖时间的延长逐渐升高,最高时丰度为11.77±0.29,约为正常水平的12倍。(3)siRNA2序列抑制率明显高于siRNA-1组和siRNA-3组(P<0.05),其抑制率高达80.11%。(4)OGD/R诱导bEnd.3细胞24h后促血管新生相关基因VEGF,bFGF的mRNA相对表达水平较对照组均升高(P<0.05);转染siRNA-2 24h并且OGD/R诱导bEnd.3细胞24h后,RT-qPCR检测VEGF,bFGF的mRNA相对表达水平均显著降低(P<0.05)。结论:1.与侧支循环不良组相比,侧支循环良好组LncRNA SNHG17的相对表达量升高,提示LncRNA SNHG17表达水平与缺血性脑卒中后侧支循环的形成可能存在一定的相关性。2.bEnd.3细胞OGD/R损伤模型中LncRNA SNHG17相对表达水平升高,提示LncRNA SNHG17可能参与缺血性脑卒中后血管新生的形成过程。3.LncRNA SNHG17与OGD/R环境下bEnd.3细胞的促血管新生相关基因VEGF和bFGF表达增加具有相关性,提示LncRNA SNHG17表达水平与血管新生相关,为缺血性脑卒中的诊断和治疗奠定了重要理论基础。