研究目的:本次研究的目的是检验查尔酮化合物黄当归醇（Xanthoangelol,XAG）的抗肝癌效果,并探索XAG在肝癌（Hepatocellular Carcinoma,HCC）中的有效靶标及作用机制。研究方法:细胞实验:我们用不同浓度的XAG（0,10和20μM）和不同时间（24和48h）分别作用于Bel7402、SMMC7721、Hep3B和Huh7细胞,采用CCK-8法检测细胞活性,运用流式细胞仪检测了细胞凋亡率,运用Transwell实验检验细胞迁移和侵袭的能力,运用Western Blotting实验检测了凋亡相关蛋白以及差异蛋白的表达,运用JC-1染色法探究XAG对线粒体膜电位（MMP）的影响。动物实验:通过在小鼠左腹注射SMMC7721细胞构建体内HCC异种移植模型,评价XAG在体内的抗肿瘤活性,TUNEL法检测肿瘤组织中细胞凋亡情况,并观察XAG对肺、肝脏、脾脏、肾及心脏组织的毒副作用,采用免疫组化（IHC）检测小鼠肿瘤组织与癌旁组织中CCNB1、CCNB2、CDC20、MCM2、MCM3、MCM4、MCM5、MCM6、MCM7、PLK1蛋白的表达。采用尾静脉注射Huh7细胞的方法构建体内肝癌肺转移异种移植模型,以评估XAG对肺转移灶的影响,HE染色检测肺组织切片的病理变化。临床组织样本实验:于2016年6月至2018年2月期间,收集了21例HCC患者的癌组织及癌旁组织,采用IHC检测癌组织和癌旁组织中CCNB1、CCNB2、CDC20、MCM2、MCM3、MCM4、MCM5、MCM6、MCM7、PLK1蛋白的表达及其差异。蛋白质组学实验:我们利用蛋白质组学技术和纳米质谱-色谱联用技术检测SMMC7721和Huh7经XAG处理后蛋白质的变化,并使用Western Blotting和PCR技术进行验证。借助TCGA数据库中HCC患者的数据信息,对上述实验中检测到的差异蛋白进行再次验证。研究结果:HCC细胞在含有XAG（0、10和20μM）的环境中温育24小时和48小时,发现XAG能有效抑制HCC细胞生长以及诱导内源性细胞凋亡。HCC细胞经XAG（0、5和10μM）温育24小时和48小时后,未检测到细胞活力的显著差异,但XAG（5和10μM）能显著抑制HCC细胞的迁移、侵袭和上皮细胞向间质转化（Epithelial-mesenchymal transition,EMT）。在小鼠体内,进行腹腔注射（40和80mg/kg）,结果显示XAG能显著抑制肿瘤生长以及肺转移,并且对肺、肝脏、脾脏、肾及心脏组织均无急性损伤作用。蛋白质组学结果显示130个蛋白呈现上调、167个蛋白呈现下调,GO分析、KEGG分析、以及PPI网络图显示差异蛋白主要集中在细胞周期和DNA复制等生物学过程。免疫组化染色测定21例临床病人的HCC组织和正常癌旁组织中10个候选基因的表达结果与蛋白质组学测定结果一致;Kaplan-Meier生存分析结果与蛋白质组学测定结果一致;免疫组化染色测定肝癌异种移植模型小鼠的HCC组织和正常癌旁组织中10个候选基因的表达也与蛋白质组学测定结果一致。结论及意义:利用体内外实验,我们发现XAG可以有效抑制HCC细胞生长、侵袭迁移、EMT以及诱导HCC细胞的内源性凋亡;XAG对小鼠肺、肝脏、脾脏、肾和心脏组织均无急性损伤作用,表明XAG在体内具有显著抗肿瘤作用并且其对小鼠的毒副作用较弱。蛋白质组学结果显示差异蛋白主要集中在细胞周期和DNA复制等生物学过程。因此,我们推测XAG可通过作用于细胞周期而发挥抗肿瘤作用,并且有望与其他抗肿瘤药联合使用,以降低肝癌细胞的耐药性。