紫茎泽兰提取物对美国白蛾生物活性及解毒酶的影响

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为了寻找防治美国白蛾的植物源农药材料,本试验以外来入侵恶性杂草—紫茎泽兰(Eupatorium adenophorum)为原材料,采用减压蒸馏法对紫茎泽兰杀虫活性物质进行了初步的分离和纯化,测定了紫茎泽兰根、茎、叶的粗提物提取率;采用微量点滴法测定了不同浓度紫茎泽兰乙醇提取物对美国白蛾幼虫在不同时间的触杀校正死亡率,并利用SPASS软件对各处理间校正死亡率进行了比较分析;采用夹毒叶片法测定了不同浓度提取物对美国白蛾幼虫在不同时间的胃毒校正死亡率;并对取食提取物的美国白蛾幼虫进行了解毒酶活性测定,分析了紫茎泽兰提取物活性物质对美国白蛾幼虫体内乙酰胆碱酯酶、羧酸酯酶和谷胱甘肽-S-转移酶活性的影响。研究结果如下:1.紫茎泽兰根、茎和叶的粗提物平均提取率分别为1.350%,4.140%和5.893%,以叶的提取率最高。2.分别从紫茎泽兰根、茎、叶提取的活性物质对美国白蛾幼虫触杀校正死亡率无显著差异(P<0.05),可初步认为对美国白蛾幼虫有触杀作用的活性物质在紫茎泽兰植株的根、茎、叶都有分布。3.紫茎泽兰乙醇提取物对美国白蛾幼虫有较强的触杀活性。0.5、1.0、2.0和5.0g/L提取物乙醇溶液处理48h后校正死亡率分别为:37.49%、59.07%、71.48%和74.45%,LC50=0.13g/L,95%置信区间为0.099~0.159g/L,0.25g/L处理触杀效果不明显;各浓度处理校正死亡率均随处理时间延长而增长,高浓度(>1.0g/L)处理校正死亡率增长较快。4.紫茎泽兰乙醇提取物活性物质对美国白蛾幼虫同样存有较强的胃毒活性。0.5、1.0、2.0和5.0g/L紫茎泽兰提取物乙醇溶液处理48h后校正死亡率分别为:34.68%、47.53%、72.57%和75.31%,LD50=0.210μg/g,95%置信区间为0.158~0.261μg/g。提取物活性物质对美国白蛾幼虫的胃毒作用相比触杀见效慢,2.0g/L紫茎泽兰乙醇提取物分别采用微量点滴法和夹毒叶片法处理后6h校正死亡率分别为26.36%和0.36%,差异显著;24h校正死亡率分别为63.15%和61.89%,差异不显著。5.本研究发现紫茎泽兰乙醇提取物活性物质对美国白蛾幼虫乙酰胆碱酯酶、羧酸酯酶和谷胱甘肽-S-转移酶3种解毒酶有着不同的影响。①经处理后的美国白蛾幼虫乙酰胆碱酯酶活性表现下降趋势,乙酰胆碱酯酶活性受到抑制,且抑制作用随浓度升高逐渐增强。幼虫经0.5、1.0、2.0和5.0g/L紫茎泽兰乙醇提取物溶液处理12h后测定的乙酰胆碱酯酶OD值分别为107.87、97.03、91.78和83.11nmol/mg?min,为对照的54.71%、49.21%、46.55%和42.15%;处理48h后各浓度处理OD值下降至各自最低值。②实验结果表明美国白蛾幼虫体内羧酸酯酶OD值在48h内5个浓度处理均表现下降趋势,较高浓度处理(>0.5g/L)对美国白蛾幼虫体内羧酸酯酶活性抑制作用明显。美国白蛾幼虫经0.5g/L提取物溶液处理,6h后测定发现羧酸酯酶OD值下降到对照的83.24%,12h时处理OD值为对照的67.52%,处理48h后仅为对照的41.82%。③美国白蛾幼虫经处理后体内的谷胱甘肽-S-转移酶活性总体表现为先激活后抑制。2.0g/L紫茎泽兰提取物乙醇溶液处理美国白蛾幼虫6h后体内谷胱甘肽-S-转移酶OD值分别为334.45nmol/ mg?min,为对照OD值的11.62倍,显著高于对照;处理48h后OD值降低至对照的74.69%。
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