β淀粉样蛋白(amyloidβpeptide,Aβ)是治疗阿尔兹海默氏病的关键靶标之一。目前免疫治疗使用的免疫原Aβ主要通过化学方法合成,生产成本高且免疫性弱,不能满足科研和医疗对免疫原的需求。基因工程技术为高免疫性Aβ的大量生物合成提供了有效途径。本文构建了Aβ串联基因的真核及原核表达载体,研究了Aβ基因在大肠杆菌的表达并获得了转基因烟草,为利用基因工程技术生产Aβ疫苗奠定了基础。本实验依据人类Aβ基因序列及重叠PCR技术原理设计引物,通过PCR扩增获得2个Aβ基因串联的DNA片段(2Aβ);将此片段克隆到载体pGEX-6P-1(GST)中,构建了原核表达载体pGEX-6P-1-Aβ;将此载体转化大肠杆菌BL21并进行蛋白诱导表达;利用GST抗体进行的Western杂交检测结果显示,GST/Aβ融合蛋白能在大肠杆菌中表达,但表达量低而且有降解。为提高外源基因在植物中的表达水平,本实验构建了含双CaMV35S启动子及TEV增强子的植物表达载体pBIDST(d35S-tev/gus);转基因烟草的GUS组织化学染色结果初步表明,d35S-tev驱动的gus基因的表达水平高于CaMV35S。为进一步研究Aβ基因在植物中的表达情况及在不同启动子驱动下的表达差异,构建了含2Aβ基因的植物表达载体pBI121-Aβ和pBIDST-Aβ,通过根癌农杆菌介导转化烟草,获得了抗性植株,PCR和RT-PCR检测结果证实,不同启动子驱动的2Aβ基因已整合进烟草基因组中并进行了转录。