木霉菌(Trichoderma spp.)的种类鉴定及生防菌株的筛选

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从福建省的食用菌、植物线虫虫体和植物根际土壤中共分离到125个木霉(Trichoderma)菌株,根据形态学特征和培养性状,鉴定出5种木霉:哈茨木霉(T.harzianum)、绿色木霉(T.viride)、康氏木霉(T.koningii)、拟康氏木霉(T.pseudokoningii)和长枝木霉(T.longibrachiatum),植物根际土壤中的优势种为哈茨木霉和绿色木霉,食用菌上的优势种为康氏木霉和拟康氏木霉,植物线虫虫体上的优势种为绿色木霉。这些木霉菌菌株经PSA平板生物量观测和对香蕉炭疽病菌(Colletotrichum musae)、西瓜枯萎病菌(Fusarium oxysporum f.sp.niveum)、水稻纹枯病菌(Rhizoctonia solani)和红麻灰霉病菌(Botrytis cinerea)等4种植物病原真菌的拮抗性测定,从中筛选出4株高效拮抗木霉菌,分别为哈茨木霉TGy040604、绿色木霉TGc050601、绿色木霉TGc050609和绿色木霉TZxj050610。对木霉菌的生防机理研究表明,这4株木霉菌对植物病原真菌有竞争性抑制作用、寄生作用和抗生作用。寄生性测定结果,木霉菌对红麻灰霉菌和水稻纹枯病菌有很强的寄生作用,但未发现寄生于炭疽菌、镰刀菌等植物病原真菌,显示了木霉菌对寄主病原真菌具有寄生专化性。拮抗性测定结果,这4株木霉菌对供试的植物病原真菌都具有很强的拮抗作用。对木霉菌代谢活性物质的研究表明:木霉菌产几丁质酶能力与其对南方根结线虫卵的寄生性呈正相关;发酵液中存在分子量大于10000Da的抑菌蛋白和分子量小于10000Da的小分子物质,这两类物质具有抑菌效果;以香蕉炭疽菌为靶标菌,蛋白和水溶性的小分子物质主要是抑制炭疽菌的芽管和菌丝的生长,脂溶性的小分子物质主要是抑制炭疽菌孢子的萌发,其抑制强度与脂溶性小分子物质的浓度有关;发酵液活性物质在不同酸碱度条件下稳定,常温下较耐贮藏,放置2个月后仍保持较强的抑菌活性。发酵时间对抑菌产物的形成有一定影响,发酵第9d的发酵液其抑菌作用最明显。对TGy040604的培养条件研究结果:PSA适合该菌株生长,在28℃、pH6.0的环境下有利其生长和产孢;以葡萄糖为最隹碳源、牛肉浸膏为最隹氮源;在培养基中添加维生素、硼、镁、铝有利于菌株的生长和产孢,添加尿素、锰、铜、锌对菌株生长和产孢有抑制作用;在固体培养基中添加炭疽菌菌丝粉末能促进菌株产孢;木霉菌与西瓜枯萎病菌共培养能提高木霉菌的生物量及产孢量。木霉菌TGy040604发酵液对植物有促生防病功能。用稀释100倍的发酵液浸种能促进番茄种子萌发,提高发芽率和发芽势;黄瓜种子经稀释200倍的发酵液浸种后,能促进种子萌发和植株的生长;发酵液对香蕉炭疽病有一定的防治效果,先喷木霉菌发酵液24h后再喷炭疽菌的防治效果最好。
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