TGF-β1,bFGF对人腹膜间皮细胞纤维连接蛋白分泌的影响

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目的正常的腹膜是由单层间皮细胞及其下方的细胞外基质组成,能够防止肿瘤细胞对于腹膜的粘附。腹腔游离胃癌细胞可通过分泌多种细胞因子破坏间皮细胞导致腹膜纤维化。腹膜纤维化为胃癌腹膜转移提供了适宜的“土壤”。为进一步探讨胃癌细胞对间皮细胞的影响,我们研究了TGF-β1,bFGF对人腹膜间皮细胞纤维连接蛋白分泌的影响方法实验分为实验组和对照组,对照组为单纯培养不使用TGF-β1或bFGF的人腹膜间皮细胞,实验组分别为用1ng/ml,10ng/ml,100ng/ml TGF-β1和1ng/ml,10ng/ml,100ng/ml bFGF刺激人腹膜间皮细胞株(HPMC_S)。采用MTT染色法观察HPMC_S生长曲线,ELISA方法观察HPMC_S细胞上清液中Fn的表达,RT-PCR方法观察细胞中Fn的mRNA表达。结果MTT染色法测得经过1ng/ml,10ng/ml,100ng/ml TGF-β1和1ng/ml,10ng/ml,100ng/ml bFGF刺激的人腹膜间皮细胞株其增值率高于未经刺激的空白对照组(P<0.05)且与给药浓度呈正相关。同浓度TGF-β1组和bFGF组间无明显差异(P>0.05)。ELISA方法测得1ng/ml,10ng/ml,100ng/ml TGF-β1和1ng/ml,10ng/ml,100ng/ml bFGF刺激的人腹膜间皮细胞株其Fn蛋白的表达明显高于未经刺激的空白对照组(P<0.05)且与给药浓度呈正相关,同浓度TGF-β1组和bFGF组间无明显差异(P>0.05)。RT-PCR方法测得经过1ng/ml,10ng/ml,100ng/mlTGF-β1和1ng/ml,10ng/ml,100ng/ml bFGF刺激的人腹膜间皮细胞株其细胞Fn mRNA表达量明显上调。结论TGF-β1和bFGF可刺激人腹膜间皮细胞增值,并提高人腹膜间皮细胞Fn的表达和细胞内Fn mRNA的表达,进而促进腹膜纤维化,为胃癌腹膜转移提供适宜环境。
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